基于膠體金、量子點(diǎn)的β-興奮劑多殘留免疫層析試紙條研制.pdf

1、β-興奮劑（β-agonist）是一類化學(xué)結(jié)構(gòu)和生理功能類似于去腎上腺素和腎上腺素的苯乙胺類藥物。β-興奮劑在臨床上常用于防治人、畜的支氣管痙攣和哮喘等病癥。大劑量的β-興奮劑能影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在動(dòng)物體內(nèi)的重新分配，顯著提高瘦肉率。因此，β-興奮劑曾被作為飼料添加劑廣泛用于畜牧生產(chǎn)中。β-興奮劑在動(dòng)物內(nèi)臟蓄積嚴(yán)重，能通過(guò)食物鏈進(jìn)入人體，使人出現(xiàn)心悸、頭暈、心律失常等癥狀，嚴(yán)重時(shí)甚至?xí)?dǎo)致死亡。因此，β-興奮劑的檢測(cè)一直是食品安全的重點(diǎn)問(wèn)題。

2、
　　目前，針對(duì)β-興奮劑多殘留檢測(cè)主要是GC/MS、HPLC-MS等儀器方法和ELISA免疫分析方法，還未有β-興奮劑多殘留免疫層析技術(shù)的研究報(bào)道。本文以β-興奮劑為研究對(duì)象，結(jié)合納米材料技術(shù)，應(yīng)用于免疫層析技術(shù)中，建立了β-興奮劑多殘留免疫層析試紙條定量檢測(cè)方法，并對(duì)建立的檢測(cè)方法的性能指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)。主要的研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下：
　?。?）采用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金溶液，并與β-興奮劑單克隆抗體進(jìn)行偶聯(lián)，形成金標(biāo)抗體復(fù)

3、合物，建立了β-興奮劑多殘留的GICA檢測(cè)技術(shù)，本方法對(duì)克倫特羅（CL）檢測(cè)線性范圍（IC20-IC80）為0.26~5.70μg/L，IC50為1.23μg/L，檢出限（LOD，IC10）為0.11μg/L，單個(gè)樣品檢測(cè)時(shí)間只需8 min；沙丁胺醇、馬布特羅、溴布特羅、氯丙那林、西馬特羅對(duì)克倫特羅都有交叉率，能實(shí)現(xiàn)β-興奮劑的多殘留檢測(cè)。對(duì)陰性豬尿的加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)中，試紙條檢測(cè)回收率在83.6％~102.19%之間，對(duì)陰性豬肉的加標(biāo)回收

4、實(shí)驗(yàn)中，試紙條檢測(cè)回收率在64.27%~87.98%之間，且批內(nèi)批間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均在15%以內(nèi)，與ELISA、HPLC-MS法的對(duì)比試驗(yàn)表明，該試紙條能應(yīng)用于實(shí)際樣品中β-興奮劑多殘留的定量檢測(cè)。
　　（2）以CdTe/ZnS量子點(diǎn)為標(biāo)記材料，采用EDC/NHS法將羧基化量子點(diǎn)與β-興奮劑單克隆抗體進(jìn)行偶聯(lián)，形成QDs-mAbs熒光復(fù)合物。通過(guò)棋盤滴定法和單因素實(shí)驗(yàn)確定最佳的實(shí)驗(yàn)參數(shù)，建立了β-興奮劑多殘留的FICA檢測(cè)技術(shù)。結(jié)

5、果表明，本方法對(duì)克倫特羅（CL）檢測(cè)線性范圍（IC20-IC80）為0.14~2.28μg/L，IC50為0.56μg/L，檢出限（LOD，IC10）為0.06μg/L，單個(gè)樣品檢測(cè)時(shí)間只需10 min；沙丁胺醇、馬布特羅、溴布特羅、氯丙那林、西馬特羅對(duì)克倫特羅都有交叉率，能實(shí)現(xiàn)β-興奮劑的多殘留檢測(cè)。對(duì)陰性豬尿的加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)中，試紙條檢測(cè)回收率在80.4%~103.7%之間；對(duì)陰性豬肉的加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)中，試紙條檢測(cè)回收率在68.67%~