萊克多巴胺膠體金試紙條的研制.pdf

1、簍萎大學工程碩士專業(yè)學位論文萊克多巴胺膠體金試紙條的研制StudyontheRactopamineColloidalGoldTestStrip萊克多巴胺膠體金試紙條的研制摘要萊克多巴胺是一種Bz腎上腺素受體激動劑，當添加到飼料中，可以提高動物的瘦肉率。但是當人食用了含有超過一定劑量萊克多巴胺的動物組織后，就會對人體造成不同程度的傷害。目前，對萊克多巴胺的檢測主要是采用色譜法，但色譜法的前處理過程繁瑣、成本高、需要專門的檢測儀器，這不適合

2、大規(guī)模的推廣。故建立一個高效、快速的萊克多巴胺檢測方法具有重要的現(xiàn)實意義。本實驗采用檸檬酸三鈉還原的方法來制備膠體金。采用單因素試驗，通過改變檸檬酸三鈉加入量、加熱時間、轉速和反應物的添加順序，對膠體金制備工藝進行優(yōu)化，結果發(fā)現(xiàn)在1％檸檬酸三鈉溶液加入量為18mL、加熱時間10min、轉速為300r／min條件下，采用檸檬酸三鈉加入到氯金酸的添加順序可以制備質量較好的膠體金溶液。采用紫外可見光譜法確定膠體金顆粒的粒徑和均一度。通過實驗發(fā)

3、現(xiàn)，所制備的膠體金粒徑大約在184nln，通過觀察膠體金溶液的可見光譜，發(fā)現(xiàn)膠體金的均一度也比較好。優(yōu)化了免疫膠體金的制備條件，最佳蛋白標記量為1318lg／mL，最適標記pH為80，選擇終濃度為l％BSA為穩(wěn)定劑。對比了不同配方的重懸液，確定了配方2為含有1％BSA、1％蔗糖、01％Tween一20的磷酸鹽緩沖液。優(yōu)化了抗原和抗體的包被條件，抗原包被濃度為05mg／mL，二抗包被濃度為10rag／mE，金標稀釋度為3倍，金標墊干燥條件

4、為室溫條件下45rain，抗原包被條件為37℃，10rain。對比了三種不同型號的金標墊(MA0270、GL0194和Ahlstrom8964)，三種不同型號硝酸纖維素膜(Sartorius140、Millipore135和PallVivid170)，四種不同型號的樣品墊(GL—b01、GLb02、GL—b03和GL。b04)、三種不周型號的吸水紙(HS5076、HS5080和HS5072)對試紙條性能的影響，最終選擇金標墊的型號為MA

5、0270，Millipore135硝酸纖維素膜的型號為Millipore135，樣品墊的型號為GLb01，吸水紙的型號為HS5072。試紙條的靈敏度為20ng／mL，交叉反應實驗說明所制各的試紙條與克倫特羅、沙丁胺醇、腎上腺素無交叉反應。在室溫下試紙條可以保存2個月以上，在不同批次和同一批次內重復性良好。對試紙條在實際檢測中的表現(xiàn)進行了測試，樣品經(jīng)過簡單的提取和除脂肪后，直接用于試紙條的測試，和傳統(tǒng)的LCMS的前處理方法相比較簡便了很多