真菌毒素多殘留膠體金免疫層析試紙條的研制.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、本研究以真菌毒素伏馬毒素B1(FB1)、黃曲霉毒素B1(AFB1)為研究對(duì)象，研制出檢測(cè)伏馬毒素B1、黃曲霉毒素B1的單殘留膠體金免疫層析試紙條以及同時(shí)檢測(cè)兩種真菌毒素的多殘留膠體金免疫層析試紙條。
　　通過(guò)優(yōu)化，確定伏馬毒素B1膠體金免疫層析試紙條的最佳工作條件為:膠體金粒徑為18nm;硝酸纖維素膜選擇(NC膜)Millipore HF135s;膠體金標(biāo)記抗體蛋白最適pH值為7.5，最佳抗體量為30μg/mL;包被原的最佳包被量

2、為0.07μg/條，金標(biāo)抗體稀釋倍數(shù)為1∶5;羊抗兔二抗稀釋倍數(shù)為1∶150;包被稀釋液為磷酸鹽緩沖溶液(PB);金標(biāo)墊處理液為PBS緩沖溶液。伏馬毒素B1膠體金免疫層析試紙條視覺(jué)檢測(cè)限為5ng/mL，檢測(cè)時(shí)間小于10 min。方法與其他真菌毒素均沒(méi)有交叉反應(yīng)，方法具有很好的特異性。谷物樣品的檢測(cè)限為100ng/g。
　　通過(guò)優(yōu)化，確定黃曲霉毒素B1膠體金免疫層析試紙條的最佳工作條件為:膠體金粒徑為18 nm;硝酸纖維素膜選擇Mi

3、llipore HF135s;膠體金標(biāo)記抗體蛋白最適pH值為8.0，最佳抗體量為20μg/mL;包被原的最佳包被量為0.07μg/條，金標(biāo)抗體稀釋倍數(shù)為1∶5;羊抗兔二抗稀釋倍數(shù)為1∶130;包被稀釋液為PBS緩沖溶液;金標(biāo)墊處理液為PBS緩沖溶液。黃曲霉毒素B2膠體金免疫層析試紙條視覺(jué)檢測(cè)限為0.5 ng/mL。檢測(cè)時(shí)間小于10 min。方法與其他真菌毒素均沒(méi)有交叉反應(yīng)，方法具有很好的特異性。谷物樣品的檢測(cè)限為5 ng/g。
　

4、　通過(guò)對(duì)伏馬毒素B1、黃曲霉毒素B1的多殘留膠體金免疫層析試紙條同時(shí)檢測(cè)兩種毒素的工作條件的優(yōu)化，確定最佳工作條件為:伏馬毒素金標(biāo)抗體和黃曲霉毒素金標(biāo)抗體混合比例為2∶1; NC膜劃線順序?yàn)橘|(zhì)控線、FB1檢測(cè)線、AFT檢測(cè)線;樣品墊處理液為0.25％ Tween-20水溶液，其他工作條件同單殘留檢測(cè)試紙條工作條件。伏馬毒素B1、黃曲霉毒素B1的多殘留膠體金免疫層析試紙條視覺(jué)檢測(cè)限分別為5 ng/mL、0.5 ng/mL。檢測(cè)時(shí)間小于10

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