氯霉素膠體金試紙條的研制.pdf

1、氯霉素是一種高效廣譜抗生素,常用于治療人體和動(dòng)物的細(xì)菌性疾病,但是氯霉素殘留對人體有較強(qiáng)的副作用,所以對于動(dòng)物源性食品中的氯霉素殘留的檢測顯得尤為重要。傳統(tǒng)氯霉素殘留分析不乏靈敏度高,準(zhǔn)確性好的檢測方法,但很難滿足現(xiàn)場、快速的檢測需求。故建立快速、高效的檢測方法并制備出相應(yīng)的產(chǎn)品是大勢所趨。
　　 本研究為了提高膠體金試紙條的靈敏度和穩(wěn)定性,對不同粒徑的膠體金試紙條工藝、樣品前處理方法進(jìn)行了優(yōu)化,具體研究內(nèi)容如下:
　　

2、 (1)膠體金試紙條工藝優(yōu)化
　　 利用氯霉素膠體金免疫層析分析方法制備氯霉素膠體金試紙條,利用檸檬酸三鈉法分別制備20、30、40nm膠體金,并分別優(yōu)化三種膠體金試紙條的制備工藝條件。結(jié)果發(fā)現(xiàn),用同樣的方法標(biāo)記三種膠體金標(biāo)記氯霉素單克隆抗體效果沒有明顯差異,只是標(biāo)記蛋白量略有不同；三種金標(biāo)抗體純化離心速度分別為10000、8000、8000r／min,粒徑越小離心速度越大；三種粒徑的膠體金可以共用試紙條材料,只是在硝酸纖維膜上

3、抗原、羊抗鼠IgG最佳包被濃度略有不同。
　　 (2)試紙條性能測試
　　 20、30、40nm膠體金試紙條靈敏度依次為7、3、9ng／mL；與青霉素、慶大霉素、鏈霉素、四環(huán)素的交叉反應(yīng)均大于200ng／mL；干燥保存2個(gè)月；30nm的膠體金制備的膠體金試紙條在穩(wěn)定性、靈敏度方面都明顯優(yōu)于20nm和40nm。
　　 (3)實(shí)際樣品檢測
　　 利用30nm膠體金生產(chǎn)氯霉素膠體金試紙條,并對實(shí)際樣品進(jìn)行檢測,