硝苯地平膠體金試紙條的研制.pdf

1、隨著改革開放的不斷深入，國民經濟高速增長，我國食品藥品行業(yè)迎來了前所未有的快速發(fā)展。然而近幾年，一些商家通過在食品或者保健食品中加入藥物成分，從而使產品獲得本身不具備的功效，以此獲取暴利。本文針對食品藥品中非法添加硝苯地平的行為，研發(fā)可檢測硝苯地平的膠體金層析試紙條，為食藥監(jiān)管部門日?；鶎颖O(jiān)管工作提供幫助。
　　首先，采用活潑酯法制備硝苯地平人工抗原，通過紫外光譜法對人工抗原進行初步鑒定，結果表明人工抗原偶聯成功。
　　其次

2、，通過動物免疫試驗制備硝苯地平單克隆抗體，建立ELISA法對單克隆抗體的效價和特異性進行了測定，單克隆抗體腹水效價為l:5×l04～l:2×l05，抗體（J5F4）對硝苯地平的IC50為225.3ng/ml，同尼群地平、尼莫地平的交叉反應率分別為9.57％和6.30%，得到的抗體特異性較好。
　　最后，通過制備純化金標抗體、組裝試紙條，確定影響每個步驟的因素參數，獲得制備膠體金層析試紙條的最佳條件，制備的膠體金粒徑為20～40nm

3、，單抗的最佳標記量為5.0μg/ml，單抗標記最佳的pH為9.0，抗原的最佳包被量為7.0μl，二抗的最佳包被量為9.0μl，膠體金標記抗體量為5.0μl，膠體金免疫層析試紙條的目測檢測限為1.0mg/L。
　　經驗證，所研發(fā)的硝苯地平試紙條的重復性、穩(wěn)定性、假陽性及假陰性率也均符合要求。
　　本研究研發(fā)出硝苯地平膠體金免疫層析試紙條，并確定制備膠體金層析試紙條的最佳條件，為檢測硝苯地平提供了一種省時、高效、操作簡單的檢測方