甘油酯及酚類基于固定酶電極的生物傳感.pdf

1、酶?jìng)鞲衅髯鳛樯飩鞲衅鞯囊环N，近年來(lái)有關(guān)其研究與應(yīng)用十分普遍，由于酶具有生物活性物質(zhì)的親和性酶-底物分子識(shí)別功能，可以選擇性的檢測(cè)待測(cè)物。而酶的專一性，使得酶?jìng)鞲衅骶哂休^高的選擇性，能夠直接用于混合樣品的檢測(cè)。酶?jìng)鞲衅饕蚱渚哂徐`敏度高、選擇性好、樣品無(wú)需預(yù)處理愈來(lái)愈受到科研工作者的重視。
　　本論文主要研究工作包括：
　　1.單油酸甘油酯在脂肪酶修飾SPE上的電化學(xué)傳感
　　以修飾印刷電極為基礎(chǔ)，確定了用脂肪酶殼聚糖修

2、飾的方法為最適宜的修飾方法。通過(guò)一系列的實(shí)驗(yàn)對(duì)選定的修飾電極進(jìn)行其它最適條件的選定，最后確定其最適脂肪酶量為0.7798μg，最適PBS的pH值為6，以及進(jìn)行循環(huán)伏安法測(cè)定時(shí)的最佳掃描速度為100 mv·s-1。用循環(huán)伏安法得到了單油酸甘油酯的標(biāo)準(zhǔn)曲線，其氧化峰線性方程為i=1.8578 lgC-4.3144，相關(guān)性系數(shù)R為0.9979，還原峰電流值與樣品濃度在一定范圍內(nèi)也呈線性關(guān)系，線性回歸方程為：i=-2.0265 lgC+2.17

3、23，相關(guān)性系數(shù)R為0.9977，線性檢測(cè)范圍為0.5～3.0 g·L-1。用計(jì)時(shí)電量法得到其的標(biāo)準(zhǔn)曲線：氧化峰線性方程為ΔQ=0.512 lgC-0.2815，線性相關(guān)系數(shù)R=0.9846，線性檢測(cè)范圍為0.5～3.0 g L-1。
　　2.脂肪酶修飾SPE測(cè)定三油酸甘油酯
　　制備了用于快速檢測(cè)三油酸甘油酯的脂肪酶修飾絲網(wǎng)印刷電極(screen-printed electrode，SPE)電化學(xué)傳感器單元。用循環(huán)伏安法(

4、cyclicvoltammetry，CV)和計(jì)時(shí)電流法(chronocoulometry，CC)研究三油酸甘油酯在脂肪酶修飾SPE上的電化學(xué)響應(yīng)，確定了測(cè)定甘油酯的最優(yōu)條件，建立了測(cè)定三油酸甘油酯濃度的電化學(xué)方法：線性范圍為0.01～5 mg·mL-1，檢出限為2.5×10-3 mg·mL-1(CV)；線性范圍為1.0×10-3～5.5 mg·mL-1，檢出限為2.0×10-4mg·mL-1(CC)。6個(gè)不同葵花籽油樣品的加標(biāo)回收率在9

5、4.4%～105.2%。
　　3.酪氨酸酶@介孔SiO2修飾NiO-SPE測(cè)鄰苯二酚
　　以酪氨酸酶修飾印刷電極原理為基礎(chǔ)，制作鄰苯二酚傳感器。利用電化學(xué)氧化法在SPE表面沉積NiO粒子，用酪氨酸酶和介孔二氧化硅混合液修飾印刷電極，二者濃度分別為3μg·μl-1、2μg·μl-1，修飾量為4μl，固定液為0.05% PDDA修飾量為1.5μl，冷藏。標(biāo)準(zhǔn)曲線為i=4.34 C+9.49×10-6，線性相關(guān)系數(shù)R=0.9896

6、。線性檢測(cè)范圍為10-9～10-3 mol L-1，最低檢出限為2.5×10-10 mol L-1。
　　4.酪氨酸酶@介孔SiO2修飾GCE檢測(cè)茶葉中鄰苯二酚
　　制作了酪氨酸酶、介孔二氧化硅修飾玻碳電極的鄰苯二酚電化學(xué)傳感器，用循環(huán)法伏安法得到了鄰苯二酚的標(biāo)準(zhǔn)曲線i=212.589 C+0.5973，線性相關(guān)系數(shù)R=0.9962。線性檢測(cè)范圍為10-10～10-2 mol L-1，最低檢出限為0.52×10-11mol