甘油酯及酚類基于固定酶電極的生物傳感.pdf

1、酶傳感器作為生物傳感器的一種，近年來有關其研究與應用十分普遍，由于酶具有生物活性物質的親和性酶-底物分子識別功能，可以選擇性的檢測待測物。而酶的專一性，使得酶傳感器具有較高的選擇性，能夠直接用于混合樣品的檢測。酶傳感器因其具有靈敏度高、選擇性好、樣品無需預處理愈來愈受到科研工作者的重視。
　　本論文主要研究工作包括：
　　1.單油酸甘油酯在脂肪酶修飾SPE上的電化學傳感
　　以修飾印刷電極為基礎，確定了用脂肪酶殼聚糖修

2、飾的方法為最適宜的修飾方法。通過一系列的實驗對選定的修飾電極進行其它最適條件的選定，最后確定其最適脂肪酶量為0.7798μg，最適PBS的pH值為6，以及進行循環(huán)伏安法測定時的最佳掃描速度為100 mv·s-1。用循環(huán)伏安法得到了單油酸甘油酯的標準曲線，其氧化峰線性方程為i=1.8578 lgC-4.3144，相關性系數(shù)R為0.9979，還原峰電流值與樣品濃度在一定范圍內也呈線性關系，線性回歸方程為：i=-2.0265 lgC+2.17

3、23，相關性系數(shù)R為0.9977，線性檢測范圍為0.5～3.0 g·L-1。用計時電量法得到其的標準曲線：氧化峰線性方程為ΔQ=0.512 lgC-0.2815，線性相關系數(shù)R=0.9846，線性檢測范圍為0.5～3.0 g L-1。
　　2.脂肪酶修飾SPE測定三油酸甘油酯
　　制備了用于快速檢測三油酸甘油酯的脂肪酶修飾絲網(wǎng)印刷電極(screen-printed electrode，SPE)電化學傳感器單元。用循環(huán)伏安法(

4、cyclicvoltammetry，CV)和計時電流法(chronocoulometry，CC)研究三油酸甘油酯在脂肪酶修飾SPE上的電化學響應，確定了測定甘油酯的最優(yōu)條件，建立了測定三油酸甘油酯濃度的電化學方法：線性范圍為0.01～5 mg·mL-1，檢出限為2.5×10-3 mg·mL-1(CV)；線性范圍為1.0×10-3～5.5 mg·mL-1，檢出限為2.0×10-4mg·mL-1(CC)。6個不同葵花籽油樣品的加標回收率在9

5、4.4%～105.2%。
　　3.酪氨酸酶@介孔SiO2修飾NiO-SPE測鄰苯二酚
　　以酪氨酸酶修飾印刷電極原理為基礎，制作鄰苯二酚傳感器。利用電化學氧化法在SPE表面沉積NiO粒子，用酪氨酸酶和介孔二氧化硅混合液修飾印刷電極，二者濃度分別為3μg·μl-1、2μg·μl-1，修飾量為4μl，固定液為0.05% PDDA修飾量為1.5μl，冷藏。標準曲線為i=4.34 C+9.49×10-6，線性相關系數(shù)R=0.9896

6、。線性檢測范圍為10-9～10-3 mol L-1，最低檢出限為2.5×10-10 mol L-1。
　　4.酪氨酸酶@介孔SiO2修飾GCE檢測茶葉中鄰苯二酚
　　制作了酪氨酸酶、介孔二氧化硅修飾玻碳電極的鄰苯二酚電化學傳感器，用循環(huán)法伏安法得到了鄰苯二酚的標準曲線i=212.589 C+0.5973，線性相關系數(shù)R=0.9962。線性檢測范圍為10-10～10-2 mol L-1，最低檢出限為0.52×10-11mol