葉酸—普魯蘭多糖—阿霉素聚合物藥物載體的制備及其性質(zhì)研究.pdf

1、在腫瘤的化療中，抗腫瘤藥物存在著嚴(yán)重的副作用，并且由于缺乏對(duì)腫瘤的選擇性及多藥耐藥性也會(huì)導(dǎo)致療效的下降及腫瘤的復(fù)發(fā)。為了解決以上問題，研究人員已經(jīng)制備出多種類型的聚合物藥物傳遞系統(tǒng)，包括聚合物藥物軛合物(polymer-drugconjugate)、脂質(zhì)體(liposome)，微球(microsphere)，納米粒（nanoparticle），膠束(micelle)等。通過這些形式將抗腫瘤藥物進(jìn)一步修飾或采用包封的方式轉(zhuǎn)運(yùn)，可有效改善其

2、水溶性，延長(zhǎng)體內(nèi)的半衰期，以期得到理想的藥物轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)?；谶@一點(diǎn)，本研究采用馬來(lái)?；蒸斕m多糖（MaleilatedPullulan；MP）為聚合物主鏈，通過酰胺鍵接合阿霉素(Doxorubicin；DOX)，改善其溶解性能，再通過鍵合葉酸(FolicAcid；FA)提高聚合物藥物的主動(dòng)靶向性，探討該聚合物藥物FA-MP-DOX體系的釋藥特性。進(jìn)一步采用透析法制備得到納米粒，物理包封更多的阿霉素入核，提高其載藥量。
　　1.馬來(lái)酰

3、化普魯蘭多糖的制備
　　定量稱取普魯蘭多糖（pullulan，MW120，000）和馬來(lái)酸酐（MA）溶解在氯化鋰/二甲基甲酰胺（10wt％）溶液中，在三乙胺的催化下，制備得到一定取代度的馬來(lái)?；蒸斕m多糖(MaleilatedPullulan;MP)。核磁共振（1H-NMR）測(cè)定其取代度。實(shí)驗(yàn)中使用的MP的取代度均為51。
　　2.馬來(lái)?；蒸斕m多糖接枝阿霉素的制備
　　按一定配比稱取馬來(lái)酰化普魯蘭多糖和阿霉素，以二甲

4、基亞楓為反應(yīng)溶劑，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽（EDC·HCl）和N-羥基丁二酰亞胺（NHS）為催化劑，反應(yīng)結(jié)束后，透析除去未反應(yīng)的小分子，冷凍干燥得到馬來(lái)?；蒸斕m多糖接枝阿霉素（MP-DOX）。
　　3.葉酸-普魯蘭多糖-阿霉素的制備及表征
　　將稍過量的葉酸用NHS活化后，與普魯蘭多糖-阿霉素在DMSO中反應(yīng)，同時(shí)EDC·HCl和三乙胺為催化劑，同上面的處理方法得到葉酸-普魯蘭多糖-阿霉素軛合物（F

5、A-MP-DOX）。采用紅外光譜、核磁光譜表征該聚合物藥物軛合物的結(jié)構(gòu)，并分別計(jì)算過程產(chǎn)物的取代度。分別采用熒光分光光度計(jì)、紫外分光光度測(cè)定聚合物藥物體系中阿霉素和葉酸的含量。
　　4.葉酸-普魯蘭多糖-阿霉素軛合物體外模擬釋藥研究
　　采用動(dòng)態(tài)透析法模擬體外釋藥，研究該體系在不同pH緩沖液中的釋藥特性。釋放出的藥物濃度用熒光分光光度計(jì)在波長(zhǎng)480nm處測(cè)定。結(jié)果表明，阿霉素的累積釋藥曲線呈現(xiàn)出pH-依賴型的釋藥特點(diǎn)。釋藥環(huán)

6、境的pH的越?。ㄋ嵝栽綇?qiáng)），藥物釋放的越快。
　　5.葉酸-普魯蘭多糖-阿霉素軛合物的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)研究
　　以A2780細(xì)胞為細(xì)胞模型，MTT法測(cè)定FA-MP-DOX的細(xì)胞毒性，監(jiān)測(cè)細(xì)胞吸收效率，利用倒置熒光顯微鏡觀察內(nèi)吞過程。結(jié)果表明FA-MP-DOX聚合物藥物能夠明顯提高內(nèi)吞效率，細(xì)胞抑制率增大，可有望成為一種阿霉素智能型控釋和靶向性聚合物前藥體系。
　　6.葉酸-普魯蘭多糖-阿霉素軛合物納米粒的制備及性質(zhì)初探