葉酸—普魯蘭多糖—阿霉素聚合物藥物載體的制備及其性質(zhì)研究.pdf

1、在腫瘤的化療中，抗腫瘤藥物存在著嚴重的副作用，并且由于缺乏對腫瘤的選擇性及多藥耐藥性也會導致療效的下降及腫瘤的復發(fā)。為了解決以上問題，研究人員已經(jīng)制備出多種類型的聚合物藥物傳遞系統(tǒng)，包括聚合物藥物軛合物(polymer-drugconjugate)、脂質(zhì)體(liposome)，微球(microsphere)，納米粒（nanoparticle），膠束(micelle)等。通過這些形式將抗腫瘤藥物進一步修飾或采用包封的方式轉(zhuǎn)運，可有效改善其

2、水溶性，延長體內(nèi)的半衰期，以期得到理想的藥物轉(zhuǎn)運系統(tǒng)?；谶@一點，本研究采用馬來?；蒸斕m多糖（MaleilatedPullulan；MP）為聚合物主鏈，通過酰胺鍵接合阿霉素(Doxorubicin；DOX)，改善其溶解性能，再通過鍵合葉酸(FolicAcid；FA)提高聚合物藥物的主動靶向性，探討該聚合物藥物FA-MP-DOX體系的釋藥特性。進一步采用透析法制備得到納米粒，物理包封更多的阿霉素入核，提高其載藥量。
　　1.馬來酰

3、化普魯蘭多糖的制備
　　定量稱取普魯蘭多糖（pullulan，MW120，000）和馬來酸酐（MA）溶解在氯化鋰/二甲基甲酰胺（10wt％）溶液中，在三乙胺的催化下，制備得到一定取代度的馬來?；蒸斕m多糖(MaleilatedPullulan;MP)。核磁共振（1H-NMR）測定其取代度。實驗中使用的MP的取代度均為51。
　　2.馬來?；蒸斕m多糖接枝阿霉素的制備
　　按一定配比稱取馬來?；蒸斕m多糖和阿霉素，以二甲

4、基亞楓為反應(yīng)溶劑，1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽（EDC·HCl）和N-羥基丁二酰亞胺（NHS）為催化劑，反應(yīng)結(jié)束后，透析除去未反應(yīng)的小分子，冷凍干燥得到馬來?；蒸斕m多糖接枝阿霉素（MP-DOX）。
　　3.葉酸-普魯蘭多糖-阿霉素的制備及表征
　　將稍過量的葉酸用NHS活化后，與普魯蘭多糖-阿霉素在DMSO中反應(yīng)，同時EDC·HCl和三乙胺為催化劑，同上面的處理方法得到葉酸-普魯蘭多糖-阿霉素軛合物（F

5、A-MP-DOX）。采用紅外光譜、核磁光譜表征該聚合物藥物軛合物的結(jié)構(gòu)，并分別計算過程產(chǎn)物的取代度。分別采用熒光分光光度計、紫外分光光度測定聚合物藥物體系中阿霉素和葉酸的含量。
　　4.葉酸-普魯蘭多糖-阿霉素軛合物體外模擬釋藥研究
　　采用動態(tài)透析法模擬體外釋藥，研究該體系在不同pH緩沖液中的釋藥特性。釋放出的藥物濃度用熒光分光光度計在波長480nm處測定。結(jié)果表明，阿霉素的累積釋藥曲線呈現(xiàn)出pH-依賴型的釋藥特點。釋藥環(huán)

6、境的pH的越小（酸性越強），藥物釋放的越快。
　　5.葉酸-普魯蘭多糖-阿霉素軛合物的生物學實驗研究
　　以A2780細胞為細胞模型，MTT法測定FA-MP-DOX的細胞毒性，監(jiān)測細胞吸收效率，利用倒置熒光顯微鏡觀察內(nèi)吞過程。結(jié)果表明FA-MP-DOX聚合物藥物能夠明顯提高內(nèi)吞效率，細胞抑制率增大，可有望成為一種阿霉素智能型控釋和靶向性聚合物前藥體系。
　　6.葉酸-普魯蘭多糖-阿霉素軛合物納米粒的制備及性質(zhì)初探