腫瘤靶向性普魯蘭基自組裝納米藥物載體的研究.pdf

1、隨著納米技術(shù)的高速發(fā)展，腫瘤靶向性納米藥物載體的研究成為熱點之一，葉酸受體在某些癌細(xì)胞表面的高表達給靶向治療提供了理論依據(jù)。本研究以乙酰普魯蘭葉酸偶合體（FPA）為材料，制備并研究腫瘤靶向性自組裝納米藥物載體，同時制備一種新型的表阿霉素納米藥物制劑，評價普魯蘭基自組裝體作為納米藥物載體的可行性。
　　 本研究以普魯蘭多糖為主鏈，通過乙?；磻?yīng)合成疏水性的乙酰普魯蘭（PA），再以N，N’-二環(huán)己基碳二亞胺（DCC）為偶聯(lián)劑，4-二

2、甲氨基吡啶（DMAP）為催化劑，將葉酸與PA偶聯(lián)合成FPA；采用氫核磁共振（1H-NMR）方法對PA和FPA的結(jié)構(gòu)進行了表征，用透析法制備了FPA納米粒子（FPANs）和包載表阿霉素的FPA納米粒子（FPA/EPI），應(yīng)用透射電子顯微鏡（TEM）和掃描電子顯微鏡（SEM）觀察了納米粒子的形貌，動態(tài)光散射法（DLS）測定了粒徑及粒徑分布；考察了FPANs和FPA/EPI在水溶液中的粒徑和在不同介質(zhì)中的電位；考察了FPANs和FPA/EPI

3、在水溶液中的穩(wěn)定性；應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測了宮頸癌Hela細(xì)胞對FPA/EPI的攝取，并研究了其攝取機制；通過將空白FPANs和乙酰普魯蘭納米粒子（PANs）200mg/kg尾靜脈注射到ICR小鼠體內(nèi)，并觀察動物的一般體征、體重和食量的變化，考察了其體內(nèi)安全性；將FPA/EPI（EPI等效劑量10mg/Kg）靜脈注射到Wistar大鼠體內(nèi)，測定了給藥后血藥濃度的變化趨勢，計算其藥代動力學(xué)參數(shù)，并與游離藥物EPI進行比較，考察了其體內(nèi)緩釋效果

4、；建立了宮頸癌Hela移植瘤動物模型，將FPA/EPI靜脈注射到建立了腫瘤模型的動物體內(nèi)，考察了其體內(nèi)分布特征以及抗腫瘤作用效果，并用TUNEL法檢測了腫瘤細(xì)胞的凋亡情況。
　　 研究結(jié)果顯示，成功合成的FPA其葉酸取代度為0.235；應(yīng)用透析法制備的FPANs和FPA/EPI，納米粒子呈均勻的球形，電中性，F(xiàn)PANs粒徑為（204.2±10.9）nm，其分散度（PDI）為0.172±0.036，載藥后粒徑和分散度分別為（273

5、.44±11.0）nm和0.165±0.026，在水溶液中，F(xiàn)PANs和FPA/EPI粒徑及粒徑分布三個月內(nèi)沒有明顯改變；FPA/EPI通過葉酸受體介導(dǎo)進入細(xì)胞，具有明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系；FPANs和PANs靜脈注射到小鼠體內(nèi)后對動物的一般體征、體重、食量及主要臟器均未見明顯的毒副作用；FPA/EPI的半衰期（t1/2）、平均滯留時間（MRT0-24h）和血藥濃度-時間曲線下面積（Auc0-24h）分別是游離藥物的1.57、1.33和3.

6、95倍；靜脈注射后2h藥物主要蓄積于腫瘤動物的肝、脾和肺，與游離藥物比較，在腫瘤組織和肝臟中，F(xiàn)PA/EPI較長時間保持較高的藥物含量，在胃和腸的含量顯著減少；FPA/EPI尾靜脈注射Hela移植瘤到裸鼠體內(nèi)，給藥4次，給藥劑量為5.0mg/kg和7.5mg/kg，相對腫瘤增殖率分別為81.38％和137.72％，瘤重抑制率分別為32.37％和61.19％，具有明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系，EPI和FPA/EPI各組均可誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡。