嬰幼兒配方食品中蛋白質鑒別標準基礎研究.pdf

1、本文旨在對嬰幼兒配方食品中應用較多的大豆蛋白質和牛乳蛋白質開展鑒別基礎研究，重點開展嬰幼兒配方食品中蛋白質組分的構成研究、兩類蛋白組分的鑒別機理研究、鑒別方法的建立以及最終的標準化評價研究。
　　首先提出了適合開展乳基嬰幼兒配方食品蛋白組分分析的SDS-PAGE優(yōu)化程序:濃縮膠濃度5％，分離膠濃度為15％，濃縮膠電壓為50V，分離膠電壓為120V，考馬斯亮藍染色，乳蛋白的上樣濃度為3～4mg/mL，上樣量為10μL，樣品前處理方法

2、為卡氏試劑處理沉淀蛋白，采用Bio-RadQuantityOne軟件對電泳譜圖進行數(shù)據(jù)分析，實現(xiàn)牛乳蛋白組分的定性和半定量測定。采用該法對我國市售乳基嬰幼兒配方食品中的牛乳蛋白有效成分進行了質量評價分析，發(fā)現(xiàn)0～12月齡嬰兒配方食品基本符合GB10765-2010中對乳清蛋白不得低于60％總蛋白的規(guī)定;0～6月齡1段嬰兒配方食品中的乳清蛋白含量最高，乳清蛋白/酪蛋白為1.57～2.12(61∶39～67∶33);6～12月齡的2段較大嬰

3、兒配方食品中乳清蛋白相對1段較少，二者比例為1.06～1.55(52∶48～61∶39);而在12月齡以上的3段幼兒配方食品中二者比例為0.65～0.71(40∶60～42∶58);另外還發(fā)現(xiàn)α-La（α-乳白蛋白）在1段嬰兒配方食品中含量偏低(19.1％～24.1％)，母乳中不存在的α-CN（α-酪蛋白）在1段嬰兒配方食品中卻占11.9％-17.8％的比例，IgG（免疫球蛋白G）在乳基嬰幼兒配方食品中的含量偏低;
　　利用SDS

4、-PAGE技術對大豆分離蛋白(Soyproteinisolated，SPI)以及豆基配方進行了分析，發(fā)現(xiàn)此法可以實現(xiàn)對SPI的定性和半定量分析，無法對豆基配方進行研究，這主要是由于豆基嬰幼兒配方食品中的蛋白被水解成易于吸收的小分子多肽而無法實現(xiàn)分離;利用該技術還實現(xiàn)了對復配雙蛋白配方食品中乳蛋白和大豆蛋白定性和半定量分析，該方法簡單、經(jīng)濟，具有較好的重復性，為企業(yè)質量監(jiān)控、政府開展嬰幼兒配方食品質量監(jiān)管提供了一種可參考的手段。
　

5、　其次，建立了一種基于反相高效液相色譜(RP-HPLC)的分析方法，對乳基嬰幼兒配方食品中的有效蛋白組分進行定性和定量分析，利用此方法可一次分離配方食品中的7種主要蛋白成分(κ-CN、αs2-CN、αs1-CN、β-CN、α-La、β-LgB、β-LgA)，回收率達82％～103％，相對標準偏差為0.1％～4.9％，該方法與傳統(tǒng)的檢測方法相比，在測定清蛋白組分時，不需提前去除優(yōu)勢蛋白酪蛋白，具有準確、靈敏和快速等特點。同時本文突破性的應