農(nóng)藥魚(yú)藤酮的遺傳毒性和淋巴細(xì)胞損傷作用初步研究.pdf

1、魚(yú)藤酮(rotenone)是一種植物源性低毒、廣譜殺蟲(chóng)劑，對(duì)害蟲(chóng)不易產(chǎn)生抗藥性，一直被視為最安全的殺蟲(chóng)劑而得到廣泛應(yīng)用，也是21世紀(jì)重點(diǎn)發(fā)展的低毒農(nóng)藥之一。但大量使用魚(yú)藤酮所造成的環(huán)境污染，及其對(duì)人類健康的危害日益引起關(guān)注。流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，環(huán)境中魚(yú)藤酮與帕金森氏癥的病因有一定聯(lián)系。實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，魚(yú)藤酮可以造成中樞神經(jīng)細(xì)胞退行性變。目前尚無(wú)其他相關(guān)疾病的報(bào)告。鑒于魚(yú)藤酮在農(nóng)業(yè)上的廣泛用途，闡明魚(yú)藤酮對(duì)機(jī)體功能的可能危害，特別是對(duì)遺傳功能

2、和免疫功能，具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。 本課題以采用鼠傷寒沙門氏菌回變?cè)囼?yàn)、中國(guó)倉(cāng)鼠肺成纖維細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)、小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)等化學(xué)品安全性評(píng)價(jià)中規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)，研究魚(yú)藤酮是否具有致突變作用，期望為其遺傳毒性的評(píng)價(jià)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。應(yīng)用MTT法、放免測(cè)定、瓊脂糖凝膠電泳等方法，整體研究和體外研究相結(jié)合，研究魚(yú)藤酮對(duì)淋巴細(xì)胞的細(xì)胞毒性和中毒后淋巴細(xì)胞功能變化。 研究發(fā)現(xiàn)：1.經(jīng)Ames試驗(yàn)，魚(yú)藤酮在1～5000μg/皿

3、濃度范圍內(nèi)，誘發(fā)TA97、TA98、TA100和TA102產(chǎn)生的回變菌落數(shù)與陰性對(duì)照相比均無(wú)明顯增加。2.經(jīng)CHL細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)，魚(yú)藤酮在40～400μg/ml濃度范圍內(nèi)CHL細(xì)胞染色體畸變率均在正常范圍。3.經(jīng)小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)，魚(yú)藤酮1.9mg/kg皮下給藥后12、24、36、48、72小時(shí)和1.9、0.38、0.19、0.038mg/kg四個(gè)劑量組皮下給藥后24小時(shí)，對(duì)骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核率均無(wú)明顯影響。4.在淋巴細(xì)

4、胞功能研究中發(fā)現(xiàn)，無(wú)論是整體研究還是體外研究，魚(yú)藤酮中毒后免疫功能明顯受到抑制，體液免疫比細(xì)胞免疫敏感，具有時(shí)間和劑量依賴關(guān)系，但具有功能恢復(fù)較早的特點(diǎn)，在2～4天就開(kāi)始恢復(fù)。5.瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)淋巴細(xì)胞DNA的改變，發(fā)現(xiàn)魚(yú)藤酮中毒可導(dǎo)致淋巴細(xì)胞DNA的損傷，4小時(shí)出現(xiàn)由DNA斷裂造成的DNA片段的梯帶現(xiàn)象(DNAladder)，12小時(shí)后出現(xiàn)細(xì)胞死亡的征象(DNAsmear)。 結(jié)果表明：在遺傳毒性研究方面，魚(yú)藤酮對(duì)TA97

5、、TA98、TA100和TA102四種測(cè)試菌株均無(wú)致基因突變作用；CHL細(xì)胞染色體畸變率均在正常范圍，未見(jiàn)誘發(fā)CHL細(xì)胞染色體畸變率增高，提示魚(yú)藤酮也不引起顯著的染色體畸變；同時(shí)也未見(jiàn)魚(yú)藤酮引起骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核率明顯升高。故而在本實(shí)驗(yàn)所選用的劑量范圍內(nèi)，魚(yú)藤酮在微生物基因突變、哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變、體內(nèi)細(xì)胞微核形成等三個(gè)終點(diǎn)上不引起明顯的致突變效應(yīng)。在淋巴細(xì)胞功能研究方面，魚(yú)藤酮中毒可造成淋巴細(xì)胞功能迅速下降。IL-2和IL-6對(duì)