農(nóng)藥魚藤酮的遺傳毒性和淋巴細胞損傷作用初步研究.pdf

1、魚藤酮(rotenone)是一種植物源性低毒、廣譜殺蟲劑，對害蟲不易產(chǎn)生抗藥性，一直被視為最安全的殺蟲劑而得到廣泛應(yīng)用，也是21世紀重點發(fā)展的低毒農(nóng)藥之一。但大量使用魚藤酮所造成的環(huán)境污染，及其對人類健康的危害日益引起關(guān)注。流行病學調(diào)查發(fā)現(xiàn)，環(huán)境中魚藤酮與帕金森氏癥的病因有一定聯(lián)系。實驗研究證實，魚藤酮可以造成中樞神經(jīng)細胞退行性變。目前尚無其他相關(guān)疾病的報告。鑒于魚藤酮在農(nóng)業(yè)上的廣泛用途，闡明魚藤酮對機體功能的可能危害，特別是對遺傳功能

2、和免疫功能，具有重要的現(xiàn)實意義。 本課題以采用鼠傷寒沙門氏菌回變試驗、中國倉鼠肺成纖維細胞染色體畸變試驗、小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗等化學品安全性評價中規(guī)定的標準實驗，研究魚藤酮是否具有致突變作用，期望為其遺傳毒性的評價提供實驗依據(jù)。應(yīng)用MTT法、放免測定、瓊脂糖凝膠電泳等方法，整體研究和體外研究相結(jié)合，研究魚藤酮對淋巴細胞的細胞毒性和中毒后淋巴細胞功能變化。 研究發(fā)現(xiàn)：1.經(jīng)Ames試驗，魚藤酮在1～5000μg/皿

3、濃度范圍內(nèi)，誘發(fā)TA97、TA98、TA100和TA102產(chǎn)生的回變菌落數(shù)與陰性對照相比均無明顯增加。2.經(jīng)CHL細胞染色體畸變試驗，魚藤酮在40～400μg/ml濃度范圍內(nèi)CHL細胞染色體畸變率均在正常范圍。3.經(jīng)小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗，魚藤酮1.9mg/kg皮下給藥后12、24、36、48、72小時和1.9、0.38、0.19、0.038mg/kg四個劑量組皮下給藥后24小時，對骨髓嗜多染紅細胞微核率均無明顯影響。4.在淋巴細

4、胞功能研究中發(fā)現(xiàn)，無論是整體研究還是體外研究，魚藤酮中毒后免疫功能明顯受到抑制，體液免疫比細胞免疫敏感，具有時間和劑量依賴關(guān)系，但具有功能恢復較早的特點，在2～4天就開始恢復。5.瓊脂糖凝膠電泳檢測淋巴細胞DNA的改變，發(fā)現(xiàn)魚藤酮中毒可導致淋巴細胞DNA的損傷，4小時出現(xiàn)由DNA斷裂造成的DNA片段的梯帶現(xiàn)象(DNAladder)，12小時后出現(xiàn)細胞死亡的征象(DNAsmear)。 結(jié)果表明：在遺傳毒性研究方面，魚藤酮對TA97

5、、TA98、TA100和TA102四種測試菌株均無致基因突變作用；CHL細胞染色體畸變率均在正常范圍，未見誘發(fā)CHL細胞染色體畸變率增高，提示魚藤酮也不引起顯著的染色體畸變；同時也未見魚藤酮引起骨髓嗜多染紅細胞微核率明顯升高。故而在本實驗所選用的劑量范圍內(nèi)，魚藤酮在微生物基因突變、哺乳動物細胞染色體畸變、體內(nèi)細胞微核形成等三個終點上不引起明顯的致突變效應(yīng)。在淋巴細胞功能研究方面，魚藤酮中毒可造成淋巴細胞功能迅速下降。IL-2和IL-6對