酶傳感器生化基礎(chǔ)與免疫力指標量化研究.pdf

1、酶傳感器將酶作為敏感元件，把酶催化反應過程中的物理或化學信號轉(zhuǎn)化為電信號以檢測被測物。由于反應的高效性與專一性，酶在生物傳感器的研究中被應用廣泛。
　　 本文通過對辣根過氧化物酶（Horseradish peroxidase，簡稱HRP，EC1.11.1.7）催化過氧化氫氧化苯酚的反應體系進行數(shù)值模擬，研究了酶傳感器檢測的生化基礎(chǔ)。模擬得到：
　　 1）反應方程的求解必須考慮其剛性問題，對于剛性方程，應該使用ODE15S

2、。
　　 2）催化反應中間復合物HRP-Ⅰ與HRP-Ⅱ隨時間變化的動力學曲線，并能確定其存在的時間。
　　 3）多組不同濃度下的反應過程曲線，對比了不同濃度下的反應速率，結(jié)果表明數(shù)值模擬能有效的減少實驗次數(shù)與縮短實驗周期。
　　 溫度和pH對酶傳感器測量精度影響較大，為了減少酶傳感器在實際測量中的誤差，指明了當前研究中將溫度和pH值兩個相關(guān)因素單獨考慮的局限性。準確得到綜合考慮了不同溫度、pH值條件下，聚硫堇和納

3、米金固定辣根過氧化物酶傳感器響應電流的特征，結(jié)果表明：
　　 1）單因素離散試驗點分析，不能準確得到酶傳感器的最適工作條件。綜合考慮溫度和pH值，該酶傳感器最適工作條件在40——45℃之間，最佳pH值在5.3——5.7之間；
　　 2）以溫度、pH值與響應電流之間的函數(shù)關(guān)系作為傳感器校正，以及實現(xiàn)線性化處理和非線性補償電路的基礎(chǔ)，能夠提高酶傳感器的測量精度，擴大使用范圍。
　　 復合酶傳感器可以對同一樣品多個指標

4、同時進行檢測，對各單一指標進行處理以獲得綜合性指標。免疫力是由多指標共同表達的一個綜合性指標，通過對中華米蝦（Caridina denticulata sinensis）投喂硒含量分別為0、0.15、0.30、0.45、0.60、0.75（μg/g）的飼料，研究了硒對中華米蝦體內(nèi)超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）、過氧化氫酶（Catalase， CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（Glutathione per

5、oxidase，GPX）等抗氧化酶活性的影響，并探討了其可能的作用機制。
　　 結(jié)果表明：
　　 1）中華米蝦體內(nèi)抗氧化酶具有協(xié)同效應，并且對硒表現(xiàn)出明顯的劑量效應；
　　 2）當飼料中添加硒濃度為0.44μg/g時，蝦體內(nèi)SOD、CAT的活性均為最高；當硒濃度為0.48μg/g時，GPX活性最高。
　　 分析了當前甲殼動物免疫力研究指標，指出目前對免疫力進行評判存在的兩個缺陷：1）不能綜合反映免疫力水平