2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、電化學免疫傳感器是一種集微生物學、免疫學、物理學、化學、信息學和電子技術等多學科相互滲透成長起來的新型先進技術,因其具有靈敏度高、特異性強、檢測快速方便、可微型化、低成本和容易實現在線檢測等優(yōu)點,在醫(yī)學、動物醫(yī)學、環(huán)境和食品安全檢測等多領域,成為有害微生物及其他有害因素快速檢測的研究熱點和發(fā)展前沿,具有廣闊而良好的應用前景。但目前仍有支持電極的選擇及修飾、抗原/抗體固定化技術是研究和開發(fā)免疫傳感器最為關鍵和重要的工作,也是目前桎梏其發(fā)展

2、的關鍵技術問題。 本論文以夏秋季節(jié)沿海地區(qū)引發(fā)食物中毒的首要病原菌--副溶血性弧菌作為實驗模型,主要圍繞以下幾個方面開展了一些工作: 1.殼聚糖-SiO2雜化復合膜酶免疫傳感器快速檢測VP。 為改善已有免疫傳感器存在的關鍵技術問題--生物敏感元件的固定化方法及其生物活性的保持,采用溶膠-凝膠法制備了CS-SiO2雜化復合膜,將辣根過氧化物酶標記副溶血性弧菌抗體(HRP-anti-VP)摻雜于該雜化復合膜中,制備副

3、溶血性弧菌酶免疫電極。通過循環(huán)伏安法表征免疫電極和監(jiān)測酶促反應,根據免疫反應前后還原峰電流下降的百分數(DP)來實現對VP的檢測。在優(yōu)化的免疫反應條件及電化學檢測條件下,在104-109 cfu/mL濃度范圍內,免疫電極免疫反應前后還原峰電流下降的百分數(DP)與VP濃度C的對數呈線性關系,線性回歸方程為DP=6.51gC-3-319,線性相關系數為0.9958,檢測限為6.9×103 cfu/mL(S/N=3)。該免疫電極具有較好的特

4、異性、重現性(RSD<6%)、穩(wěn)定性(一周后電流響應為初始值的95%)和準確性(與GB/T4789.7-2003符合率96.7%)。因此,研制出的免疫傳感器用于快速篩檢VP效果良好。 2.電沉積納米金修飾4-SPCE電流型VP酶免疫傳感器的研制。 為改善免疫傳感器的生物相容性和反應信號強度,采用恒電位沉積法將HAuCl4直接還原成納米金并修飾于四通道絲網印刷碳電極(4-SPCE)表面,優(yōu)化選擇了0.05 g/L HAuC

5、l4濃度和30 s電沉積時間為電沉積納米金修飾4-SPCE的制備條件。利用靜電吸附作用將辣根過氧化物酶標記副溶血性弧菌抗體(HRP-anti-VP)固定,制備副溶血性弧菌酶免疫電極。通過循環(huán)伏安法表征免疫電極和監(jiān)測酶促反應,根據免疫反應前后還原峰電流下降的百分數(DP)來實現對VP的檢測。在優(yōu)化的免疫反應條件及電化學檢測條件下,免疫電極線性檢測范圍為104-109 cfu/mL,其線性回歸方程為:DP=7.71gC-12.63,線性相關

6、系數為0.9973(n=6),檢測限為8.1×104 cfu/mL(S/N=3)。該免疫電極具有較好的特異性、重現性(RSD<6%)、穩(wěn)定性(一周后電流響應為初始值的90%)和準確性(與GB/T4789.7-2003符合率93.3%)。因此,研制出的免疫傳感器用于快速篩檢VP效果良好。 3.基于戊二醛交聯的4-SPCE電流型VP酶免疫傳感器的研制。 為了尋找一種簡單、有效的固定抗體的方法來研制四通道絲網印刷碳電極(4-S

7、PCE)免疫傳感器,采用戊二醛交聯法將辣根過氧化物酶標記副溶血性弧菌抗體(HRP-anti-VP)固定于4-SPCE表面,制備了副溶血性弧菌酶免疫電極。通過循環(huán)伏安法表征免疫電極和監(jiān)測酶促反應,根據免疫反應前后還原峰電流下降的百分數(DP)來實現對VP的檢測。在優(yōu)化的免疫反應條件及電化學檢測條件下,在103-109 cfu/mL濃度范圍內,免疫電極免疫反應前后還原峰電流下降的百分數(DP)與VP濃度C的對數呈線性關系,線性回歸方程為DP

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