多種信號放大生物技術在電化學適體傳感器中的應用.pdf

1、獨創(chuàng)性聲明學位論文題目:多種信號放大生物技術在電化學適體傳感器中的應用本人提交的學位論文是在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。論文中引用他人已經發(fā)表或出版過的研究成果，文中己加了標注。對本研究及學位論文撰寫曾做出貢獻的老師、朋友、同仁在文中作了明確說明并表示衷心感謝。學位論文作者:以均簽字日期:川5年5月予日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解西南大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的

2、復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權西南大學研究生部可以將學位論文的全部或部分內容編入有關數據庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。(保密的學位論文在解密后適用本授權書，本論文:口不保密，口保密期限至年月止)。學位論文作者簽名:弘均簽字日期:“)0I號年5月3日導師簽名:l盯在簽字曰期:hri年了月)日摘要多種信號放大生物技術在電化學適體傳感器中的應用分析化學專業(yè)碩士研究生張純指導教授袁若教授摘要電化

3、學適體傳感器是一類將適體作為分子識別物質和電化學信號傳導相結合的新穎的生物傳感器，在蛋白的檢測及疾病的早期診斷中發(fā)揮著重要的作用。它不僅具有適體對目標分子的高親和力和高特異性，而且還具有電化學分析方法在靈敏、快速、簡單、活體檢測和低成本等方面的優(yōu)勢。近幾年來，為了提高適體傳感器對自標分子檢測的靈敏度，多種信號放大技術被廣泛應用于傳感器的研究中。因此，利用信號放大技術和電化學傳感技術，研制有效、可靠、高靈敏的適體傳感器有著十分重要的現實意

4、義。本文主要研究如下1.基于雜交鏈式反應和HeminG叩ladruplex模擬酶構建的仿雙酶凝血酶適體傳感器雙酶催化放大信號優(yōu)于單隅催化體系，本文通過雜交鏈式反應CHCR)在雙鏈DNA主形成大量具有仿雙酶作用的heminG叩ladruplex復合物，它可以同時作為NADH氧化酶和HRP模擬酶放大響應信號，構建了一個新穎、靈敏的適體傳感器用于凝血酶的檢測。在體系中，基于雜交鏈式反應生成長鏈DNA聚合物不僅能固載大量的電活性物質亞甲基藍(M

5、B)，而且能在DNA現鏈上形成大量的hemin!G叩Iadruplex復合物。當在檢測液中存在NADH時，heminG叩ladrup!ex首先作為NADH氧化酶將NADH氧化為NAD，接著又充當過氧化氫模擬酶在MB的幫助下氧化還原H202，來提高MB的響應信號，從而提高傳感器的靈敏度。當傳感器表面的凝血酶適體鏈捕獲樣品溶液中的目標物蛋白攝血酶時，雙鏈DNA上的亞甲墓藍和hemin!G叩ladruplex復合物就會脫離傳感器表面，致使MB

6、的響應電流值發(fā)生了改變。我們就可以根據電流值的變化定量的檢測凝血酶的濃度，該傳感器的線性范圍為0.01nmo!LI50nmolL斗，檢測限為2pmolL1。實驗結果表明，基于該信號放大技術構建的適體傳感器具有良好的選擇性、重現性和穩(wěn)定性。從而為檢測提血酶提供了一種簡單、靈敏的方法。2.多孔二氧化硅修飾的多壁碳納米管和模擬酶雙重信號放大的凝血酶適體傳感器本立以多孔二氧化硅功能化的多里碳納米營(mSi02@MWCNT)作為多功能的載體和HR