基于有機(jī)納米功能膜的光學(xué)生物傳感研究.pdf

1、近年來(lái)，納米材料獨(dú)特的光學(xué)、磁學(xué)、電子學(xué)和力學(xué)特性已經(jīng)受到研究者的廣泛關(guān)注。金納米粒子由于其良好的穩(wěn)定性、小尺寸效應(yīng)、表面效應(yīng)、光學(xué)效應(yīng)和特殊的生物親和性，使它成為了生物科學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)和重點(diǎn)?；诮鸺{米顆粒修飾的生物傳感器的發(fā)展對(duì)疾病的診斷和監(jiān)護(hù)、藥物開(kāi)發(fā)、蛋白組學(xué)和生物試劑的環(huán)境監(jiān)測(cè)更是有著非常重要的意義。
　　 本論文主要研究了金納米粒子在光學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用，即局部表面等離子體共振技術(shù)(LSPR)，通過(guò)生物學(xué)抗原抗體的識(shí)別、

2、以及在線監(jiān)控，具體用于生物領(lǐng)域的疾病的預(yù)防和控制研究。本研究分為金納米顆粒制備及表征、金納米顆粒膜的修飾、基于金納米顆粒修飾膜用于致癌基因c-myc蛋白的光學(xué)檢測(cè)研究、基于金納米顆粒修飾膜用于DNA的光學(xué)檢測(cè)研究，基于金納米顆粒修飾膜用于抗原抗體間定量識(shí)別等幾個(gè)部分。
　　 1.本文采用PVP作保護(hù)劑、檸檬酸鈉作還原劑的經(jīng)典化學(xué)還原法制備了質(zhì)地均勻、分散性較好的金溶膠，用紫外-可見(jiàn)光譜(UV-Vis)、透射電子顯微鏡(TEM)對(duì)

3、其進(jìn)行了表征。
　　 2.利用自組裝方法，將DTT自組裝在金膜表面，通過(guò)比較L-半胱氨酸與3-琉基丙酸的優(yōu)缺點(diǎn)，最終鍵合3-琉基丙酸，初步形成用于分子識(shí)別檢測(cè)的生物傳感器。
　　 3.由于親核反應(yīng)中，DMAP的活性較NHS強(qiáng)，突破傳統(tǒng)EDC+NHS的催化作用，本文采用EDC+DMAP作為氨基與羧基反應(yīng)的催化劑。
　　 4.將組裝修飾后的納米金生物傳感器，識(shí)別c-myc單克隆抗體，其最大吸附量為2.40μg/mL(

4、5mmx5mm金電極)。
　　 5.固定c-myc單克隆抗體量，識(shí)別c-myc蛋白，得到c-myc的最大識(shí)別量為1.82μg/mL。低濃度線性范圍在6.5x10<,-3>μg/mL-1.3μg/mL，最低檢測(cè)限為6.5×10<,-3>μg/mL，重現(xiàn)性的相對(duì)平均偏差分別為3.22％和1.56％，回收率范圍在92.31％-109.23％。
　　 6.固定c-myc蛋白，識(shí)別質(zhì)粒DNA，得到其最大識(shí)別量為2.Oμg/mL。低