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文檔簡介
1、表沒食子兒茶素沒食子酸(EGCG,epigallocatechin-3-gallate)是綠茶中提取分離出的茶多酚類的生物活性物質(zhì),具有毒性低、來源廣、易溶于水等優(yōu)點。隨著現(xiàn)代科學技術的發(fā)展,許多學者研究證明EGCG具有抗腫瘤、抗氧化、抗菌消炎等生物活性,是一類極具開發(fā)前景的天然產(chǎn)物。但是,EGCG在體內(nèi)對腫瘤組織的定向攻擊很弱,生物利用度非常差,目前使用高劑量的EGCG注射劑來高效控制或是抑止腫瘤細胞生長與轉移還非常的困難,這些都嚴重
2、影響臨床治療的效果。
前列腺癌被認為是發(fā)病最廣的癌癥之一,在歐美前列腺癌導致的死亡率僅次于肺癌,列第二。我國前列腺癌發(fā)病率已由20世紀50年代的0.2/10萬人增至20世紀90年代的1.2~3.4/10萬人,70歲以上的男性,前列腺前期癌的發(fā)病率達25%。最近研究發(fā)現(xiàn),常飲綠茶可以有效降低前列腺癌發(fā)病率,科學家研究表明,該有效作用成分即為綠茶中的EGCG。EGCG可以調(diào)節(jié)癌細胞凋亡的相關蛋白,并且能控制腫瘤細胞的細胞周期,使癌
3、細胞失去轉移和擴散的能力。靶肉給藥系統(tǒng)(TDDS)是一種新的制劑技術與工藝,他能將治療藥物最大限度得輸送到靶器官,而對非靶器官影響很小,從而達到高效低毒的治療效果,尤其適用于治療癌癥等疾病。
本課題主要是基于EGCG的優(yōu)點,結合納米技術和靶向工藝,通過去溶劑法納米制備技術,獲得EGCG的納米靶向制劑。同時結合微觀檢測技術及細胞培養(yǎng)技術,研究該方法下制備EGCG納米靶向制劑的最優(yōu)化工藝;同時,將制備的EGCG納米制劑作用于前列腺
4、癌細胞PC-3,研究其對腫瘤細胞的靶向作用,以及對其進行功能性和活性評價。以此獲得具有優(yōu)良穩(wěn)定性、高生物利用度、腫瘤靶向性的EGCG納米注射制劑及其相應的制備工藝和質(zhì)量控制標準。
本論文研究得出:
1、采用原子力顯微鏡(AFM)觀測納米粒形貌和粒徑,所得FA-EGCG-BSANP的平均粒徑為200 nm左右,且分布均勻;
2、高效液相法測定EGCG的載藥量和包封率,測得結果為:EGCG的包封率可達(81.5
5、±1.8)%,載藥量為(29.3±0.6)%;
3、紫外分光光度法進行全波長掃描,測定葉酸和白蛋白的偶聯(lián)量,測定結果為,葉酸偶聯(lián)量為18.363μg· mg-1BSA;
4、以激光共聚焦和熒光分光光度計測定FA-EGCG-BSANP對PC-3細胞的靶向性,測定結果為,PC-3細胞對FA-EGCG-BSANP的攝取量為EGCG-BSANP的23.65倍,并且呈現(xiàn)較強的濃度依賴性。同等濃度下FA-EGCG-BSANP對P
6、C-3細胞的抑制率為82.8%,而純EGCG溶液和EGCG-BSANP分別為58.6%和55.1%,并且抑制率同PC-3細胞對這些粒子的攝取能力正相關;
5、MTT法測定其體外活性,結果表明,F(xiàn)A-EGCG-BSANP能明顯提高EGCG對PC-3細胞的靶向效果,并提高了對細胞的致死作用,從而提高了EGCG作為一種潛在抗癌藥物的治療效果,為進一步探索該納米粒在體內(nèi)的靶向性、活性和代謝規(guī)律提供了前期實驗基礎。
通過以上實
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