鈦氧薄膜材料表面層粘連蛋白修飾以及內(nèi)皮化研究.pdf

1、本文采用非平衡磁控濺射沉積技術制備了具有金紅石與銳鈦礦混合結(jié)構的鈦氧(Ti-O)薄膜，并在此基礎上，對Ti-O薄膜進行表面生物化改性。通過氫氧化鈉(NaOH)活化處理使Ti—O薄膜表面產(chǎn)生活性基團-OH，并通過硅烷偶聯(lián)劑氨丙基三乙氧基硅烷(APTE)固定細胞外基質(zhì)中的層粘連蛋白(Ln)。另外，采用傅立葉變換紅外光譜儀(FTIR)、X射線光電子能譜(XPS)、原子力顯微鏡(AFM)、掃描電子顯微鏡(SEM)、接觸角測量等方法對每一步處理后

2、的樣品表面進行了特征測試與分析，最后通過體外人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞(HUVEC)原代培養(yǎng)實驗和血小板粘附實驗評價固定Ln前后Ti-O薄膜表面細胞相容性以及血液相容性。 Ti-O薄膜經(jīng)NaOH活化后，F(xiàn)TIR結(jié)果顯示表面可產(chǎn)生親水性基團-OH；XPS結(jié)果顯示一OH對應的O峰位增強；接觸角減小，薄膜表面親水性提高。在活化的Ti-O膜表面涂覆APTE后，F(xiàn)TIR及XPS結(jié)果表明APTE中的乙氧基水解后可以和Ti-O膜表面的羥基基團反應，

3、使APTE化學鍵合到Ti—O膜表面；SEM及AFM結(jié)果顯示表面形貌變化不大，接觸角增加，親水性降低。在Ti-O薄膜表面偶聯(lián)固定Ln后，F(xiàn)TIR結(jié)果顯示樣品表面出現(xiàn)蛋白中的特征基團酰胺Ⅰ帶、酰胺Ⅱ帶基團；XPS結(jié)果顯示樣品表面出現(xiàn)S元素，說明Ln已經(jīng)固定于Ti-O薄膜表面；表面接觸角進一步增大，親水性提高，樣品表面更加致密。 體外人臍靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)實驗結(jié)果表明，Ti—O薄膜本身具有一定的內(nèi)皮細胞親和性，在Ti-O薄膜表面固定Ln

4、對內(nèi)皮細胞的生長有良好的促進作用，且在Ti-O薄膜表面通過APTE偶聯(lián)固定Ln比直接固定Ln能使細胞更好的粘附和生長。 血小板粘附實驗顯示，通過APTE偶聯(lián)固定Ln不僅能促進Ti-O薄膜表面的內(nèi)皮細胞化，同時能抑制Ti-O薄膜表面的血小板粘附和激活，提高材料表面的血液相容性。 以上的試驗結(jié)果表明，通過對Ti-O薄膜表面活化偶聯(lián)，可以將Ln成功固定在Ti—O薄膜表面.在Ti—O薄膜表面固定Ln對內(nèi)皮細胞的生長有良好的促進作