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文檔簡介
1、聚(N-異丙基丙烯酰胺)簡稱PNIPAAm,由于其大分子側(cè)鏈上同時(shí)具有親水性的酰胺基-CONH-和疏水性的異丙基-CH(CH3)2,使線型PNIPAAm的水溶液呈現(xiàn)溫度敏感的特性。這種由溫度敏感性而引起高聚物產(chǎn)生的智能型和記憶效應(yīng)引起了人們很大的興趣,智能高分子可以被設(shè)計(jì)成化學(xué)閥、傳感器的器件,用于智能型膜、記憶元件、人工肌肉、藥物釋放體系,智能高聚物目前已經(jīng)成為國際上高分子領(lǐng)域一個(gè)新的研究熱點(diǎn)。
本論文采用了共聚-螯合金
2、屬離子的方法,將異丙基丙烯酰胺單體和丙烯酸隨機(jī)共聚合成了二元線型聚合物,使聚合物既具有溫度敏感性能同時(shí)又提供了可與金屬離子螯合反應(yīng)的功能基團(tuán)-羧基-COOH。然后在PNIPAAm-co-AAm二元線型聚合物上鍵合金屬離子,從而制得同時(shí)具有溫度敏感性和親和特性的聚合物,并將其應(yīng)用在親和沉淀和雙水相萃取技術(shù)中。主要內(nèi)容如下:
采用水作為聚合反應(yīng)溶劑,氧化-還原體系(APS)為引發(fā)體系,TEMED作為加速劑,來合成聚合物PNIP
3、AAm-co-AAm,得到合成聚合物PNIPAAm-co-AAm最佳化條件為:單體濃度為4%(占溶液總質(zhì)量),單體的配比為每1.0gNIPAAm需添加AAm的量為200μl,引發(fā)劑APS的添加量為0.24%(占溶液總質(zhì)量),TEMED的加入量為0.24%(v/v,占溶液總體積)。制備得到的溫敏聚合物PNIPAAm-co-AAm具有良好的物理化學(xué)性能,不僅具有較好的溫敏性,同時(shí)還具有對pH敏感的特性,適合作為蛋白質(zhì)分離純化的載體;選擇銅離
4、子作為特異性配基,結(jié)果表明最佳螯合pH值為4.5,最佳銅離子初始濃度為2.0g/L,最佳聚合物用量為0.20g,用電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜儀檢測聚合物PNIPAAm-co-AAm對銅離子的最大吸附量為63.5mg/g。親和溫敏聚合物PNIPAAm-co-AAm-Cu具有良好的儲(chǔ)存穩(wěn)定性,溶劑適用范圍較廣。
親和溫敏聚合物PNIPAAm-co-AAm-Cu對BSA的最佳吸附條件為:pH6.0,吸附溫度為20℃,BSA的初
5、始濃度為1.0mg/ml。在相同的BSA濃度下,三種聚合物對BSA的吸附量的比較為:PNIPAAm-co-AAm<PNIPAAm<PNIPAAm-co-AAm-Cu。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明,BSA分子與金屬螯合溫敏聚合物PNIPAAm-co-AAm-Cu之間存在特異性的相互作用。
親和溫敏聚合物PNIPAAm-co-AAm-Cu對BSA的最佳洗脫條件為:pH4.00.05mol/L Tris-HCl緩沖液,其中含有0.20mol/L
6、 NaCl和0.050mol/L EDTA。金屬螯合溫敏聚合物PNIPAAm-co-AAm-Cu不僅解決了復(fù)雜性質(zhì)的多相體系的分離難題,而且也可以多次循環(huán)利用,節(jié)省了很多資源,是一種環(huán)保、高效、性能優(yōu)異的親和分離介質(zhì)。親和溫敏聚合物/葡聚糖4萬構(gòu)成的雙水相體系對BSA的最佳分離純化條件為:pH6.0,葡聚糖4萬的濃度為6.0%(w/w),親和溫敏聚合物的濃度為3.5%(w/w),BSA的初始濃度為15.0mg/ml。
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