雙水相萃取實(shí)驗(yàn)

1、一、雙水相系統(tǒng)的相圖繪制一、雙水相系統(tǒng)的相圖繪制1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私庵谱麟p水相系統(tǒng)的相圖的方法，加深對(duì)相圖的認(rèn)識(shí)。2.實(shí)驗(yàn)原理相圖是研究?jī)伤噍腿〉幕A(chǔ)，雙水相形成條件和定量關(guān)系常用相圖來(lái)表示。圖1是典型的高聚物高聚物水雙水相體系的直角坐標(biāo)相圖，兩種聚合物A、B以適當(dāng)比例溶于水就會(huì)分別形成有不同組成、度的兩相，上相組成用T點(diǎn)表示，下相組成用B點(diǎn)表示，由圖1可知上下相所含高聚物有所偏重，上相主要含B，下相主要含A。曲線TCB稱為結(jié)線，直線TM

2、B稱為系線。結(jié)線上方是兩相區(qū)，下方為單相區(qū)，若配比取在曲線上，則混合后，溶液恰好從澄清變?yōu)榛鞚?。組成在系線上的點(diǎn)，分為兩相后，其上下相組成分別為T和B，T、B量的多少服從相圖的杠桿定律。即T和B相質(zhì)量之比等于系線上MB與MT的線段長(zhǎng)度之比。又由于兩相密度相差很小，故上下相體積之比也近似等于系線上MB與MT線段長(zhǎng)度之比。圖1AB水雙水相體系相圖Figure1ThephasediagramoftheABH2Oaqueoustwophases

3、ystem3.實(shí)驗(yàn)器材和試劑（1）器材：電子臺(tái)秤，漩渦混合器，大試管，滴定管，密度計(jì)，溫度計(jì)。（2）試劑：聚乙二醇，硫酸銨，硫酸鎂。4.操作方法（1）溶液的配制配制40%的鹽（硫酸銨或硫酸鎂）溶液配制40%的聚乙二醇溶液，液體聚乙二醇可用純?nèi)芤?。根?jù)相圖，選擇五個(gè)成相比例。三、蛋白酶酶活標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制——Folin酚法或紫外分光光度法紫外分光光度法測(cè)蛋白酶酶活1原理蛋白酶在一定的溫度與pH條件下，水解酪素底物，然后加入三氯乙酸終止酶反應(yīng)

4、，并使未水解的酪素沉淀除去，濾液對(duì)紫外光有吸收，可用紫外分光光度法測(cè)定。根據(jù)吸光度計(jì)算其酶活力。酶活單位的定義：每1mL粗酶液，在一定溫度和pH值條件下，1min水解酪素產(chǎn)生1ug酪氨酸為一個(gè)酶活力單位，以（umL）表示。2試劑和溶液2.1三氯乙酸c=0.4molL：稱取三氯乙酸65.4g，用水溶解并定容至1000mL。2.2氫氧化鈉溶液c（NaOH）=0.5molL2.3鹽酸溶液c（HCl）＝1molL及0.1molL1molLHCl

5、:取90mL濃鹽酸溶解于去離子水中，定容至1000mL。0.1molLHCl：取9mL濃鹽酸溶解于去離子水中，定容至1000mL。2.4緩沖溶液a.磷酸緩沖液（pH＝7.5）適用于中性蛋白酶稱取磷酸氫二鈉（Na2HPO412H2O）6.02g和磷酸二氫鈉（NaH2PO412H2O）0.5g，加水溶解并定容至1000mL。b.乳酸緩沖液（pH＝3.0）適用于酸性蛋白酶甲液稱取乳酸（80％～90％）10.6g，加水溶解并定容至1000mL。