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文檔簡介
1、本研究以生姜為原料,于2009-2011年在山東農業(yè)大學食品科學與工程學院功能食品研究室進行,主要研究了運用雙水相萃取技術(ATPE)分離提取生姜中生姜蛋白酶的提取條件,分析了雙水相成相因素對生姜蛋白酶萃取的影響,利用該技術得到了生姜蛋白酶的等電點及三步雙水相萃取純化生姜蛋白酶的流程。主要結果如下:
⑴單鹽雙水相體系的建立。最佳PEG分子量為4000,PEG濃度為30%,選擇鹽種類為硫酸銨,濃度為10%,體系pH為8.0,
2、操作溫度選擇室溫,樣品加入量為3mL。此雙水相體系的生姜蛋白酶上相酶活力回收和純化倍數都最高,分別可達87.24%和1.85。
⑵緩沖鹽雙水相體系的建立。最佳PEG分子量為4000,PEG濃度為20%,緩沖鹽pH為6.5,緩沖鹽濃度為10%,此雙水相體系的上相酶活回收和純化倍數都最高,分別達94.99%和1.86。
⑶PEG/(NH4)2SO4 雙水相體系及PEG/(NaH2PO4-Na2HPO4)雙水相體系
3、的各相平衡關系的線性方程。各分子量PEG/(NH4)2SO4相平衡關系的線性方程分別為:y=613.33e-0.2139X;y=260.66e-0.2036X;y=178.46e-0.1969X;y=79.91e-0.174X;y=124.52e-0.2492X;y=282.31e-0.4302x。各分子量PEG/(NaH2PO4-Na2HPO4)相平衡關系的線性方程分別為:y=327.41e-0.2706x;y=170.9e-0.24
4、7x;y=105.9e-0.2508x;y=91.385e-0.3029X;y=106.04e-0.4173x;y=73.272e-0.3836x。
⑷交錯分配法(cross partitioning)測定生姜蛋白酶的等電點(pI)。通過交錯分配法測定生姜蛋白酶的等電點,得出生姜蛋白酶的等電點有兩個:即4.1和6.4,說明生姜蛋白酶含有兩個組分而且屬于酸性蛋白酶。
⑸三步雙水相萃取提取和純化生姜蛋白酶流程的建
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