Cu-Zn-SOD提取條件優(yōu)化及層層自組裝法制備PAH-PSS微囊的研究.pdf

1、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，簡(jiǎn)稱SOD）廣泛存在于動(dòng)物、植物及藻類等生物體內(nèi)，本文以牛血為實(shí)驗(yàn)原材料，進(jìn)行了牛血Cu/Zn-SOD最佳提取條件的優(yōu)化，然后采用層層自組裝技術(shù)制備了包裹有銅鋅超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)的聚電解質(zhì)微囊，最后將包裹有銅鋅超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)的聚電解質(zhì)微囊進(jìn)行了胰蛋白酶水解實(shí)驗(yàn)。結(jié)果如下：
　?、叛芯苛薈u2+濃度、Zn2+濃度、熱變性溫度和熱變性時(shí)間

2、4種單因素分別對(duì)牛血中Cu/Zn-SOD活性的影響。以4種單因素為基礎(chǔ)設(shè)計(jì)了4因素5水平正交試驗(yàn)，通過鄰苯三酚法測(cè)定了Cu/Zn-SOD活性，考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定了Cu/Zn-SOD含量，聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)定了蛋白純度，確定了牛血Cu/Zn-SOD的最佳提取條件。結(jié)果表明:當(dāng)Cu2+、Zn2+分別為6 mmol/L和12 mmol/L條件下，90℃熱變性35 min，最終提取的Cu/Zn-SOD活性為4.14×103 U/mL，比活力為6

3、.74×104U/mg。
　?、撇捎昧藢?層自組裝技術(shù)制備了包含超氧化物歧化酶(SOD)的聚電解質(zhì)微囊，以無定形態(tài)碳酸鈣顆粒為模板，采用共沉淀原理，將SOD吸附到碳酸鈣顆粒中。在碳酸鈣表面組裝聚苯乙烯磺酸鈉[poly(sodium styrene sulfonate)，PSS]和聚烯丙基胺鹽酸鹽[poly(allyamine hydrochloride)，PAH]，得到以碳酸鈣顆粒為母核，PSS/PAH為殼的核殼結(jié)構(gòu)的顆粒。用乙二

4、胺四乙酸二鈉(EDTA)溶解碳酸鈣，然后加入0.2M的Cu2+、0.2M的Zn2+，從而恢復(fù)SOD活性，得到了包含SOD的聚電解質(zhì)微囊。
　?、菍司垭娊赓|(zhì)微囊的SOD與天然SOD進(jìn)行胰蛋白酶水解試驗(yàn)，結(jié)果為包裹前的SOD活性為3.02×103U/mL，其蛋白含量為0.059 mg/mL，比活力為5.14×104U/mg，包裹后SOD活性為2.61×103 U/mL，蛋白含量為0.047 mg/mL，比包裹前的蛋白質(zhì)含量減少0