火棘果中原花青素的組成解析及對(duì)槲皮素細(xì)胞抗氧化活性的影響.pdf

1、火棘果是薔薇科蘋果亞科藥食兩用植物火棘的果實(shí)，富含類黃酮、原花青素等多酚類物質(zhì)。其中原花青素（Proanthocyanidins，PCs）被報(bào)道是許多天然保健食品的功效成分，具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)代謝、抗氧化等生理活性，但由于其生物利用度極低，尤其是大分子量的原花青素不被細(xì)胞吸收，PCs如何發(fā)揮其生理活性的途徑和機(jī)制尚不明晰。本文主要以火棘果中原花青素為研究對(duì)象，以其對(duì)小分子多酚的相互作用為切入口，通過提取、分離、系列原花青素組分，對(duì)其結(jié)構(gòu)組

2、成進(jìn)行解析，并探究 PCs與典型小分子多酚槲皮素的細(xì)胞抗氧化效應(yīng)的影響，以期揭示原花青素發(fā)揮生物活性的重要作用途徑或機(jī)理，為深入認(rèn)識(shí)天然功能食品的生理活性機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。研究結(jié)果如下。
　?。?）利用Sephade x LH-20對(duì)火棘果原花青素總提取物進(jìn)行分離，得到F1～F8不同聚合度的原花青素，利用半胱胺鹽法硫解，結(jié)合LC-MS鑒定分析硫解產(chǎn)物，對(duì)F1～F8各原花青素的聚合度和組成單元進(jìn)行了結(jié)構(gòu)解析，經(jīng)推算其聚合度依次為：6

3、.2±0.4，5.0±0.2，8.3±0.3，8.9±0.4，9.5±0.3，10.7±0.3，13.9±0.3，15.8±0.4，組成單元為兒茶素（catechin，C）、表兒茶素（epicatechin，EC）、沒食子酸（gallic acid，GC）、表沒食子酸（epigallocatechin，EGC）。
　　（2）構(gòu)建了HepG2細(xì)胞抗氧化體系的分析檢測體系。利用熒光體系二氯二氫熒光黃雙乙酸鈉（DCFH-DA）—2,2'

4、-偶氮二(2-脒基丙烷)二鹽酸鹽（ABAP）構(gòu)建自由基激發(fā)體系，研究PCs和槲皮素（quercetin，Q）共存時(shí)，Q的細(xì)胞抗氧化活性變化。結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)組F+Q、對(duì)照組火棘果提取物及Q組分的熒光衰減變化存在如下規(guī)律：對(duì)比Q組，實(shí)驗(yàn)組F+Q熒光衰減強(qiáng)度隨PCs聚合度的增加而顯著加強(qiáng)，其中Q組EC50（concentration for50％of maximal effect，EC50）為5.97，F(xiàn)8+Q組分EC50顯著降低為2.91，

5、并且該效應(yīng)與聚合度大小呈正相關(guān)；相比于Q組，對(duì)照組火棘果提取物的熒光衰減的強(qiáng)度變化不明顯，并且未檢測到PCs各組分的熒光衰減變化。
　?。?）從穩(wěn)定性和溶解性兩個(gè)方面探討了PCs提高Q細(xì)胞抗氧化作用的機(jī)理。腸液模擬體系（Fasted State Simulated Intestinal Fluid，F(xiàn)ASIF）實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，PCs能夠顯著增加Q的溶解度，并且該作用隨著PCs聚合度的增加而增強(qiáng)，增幅最大為97.4%。胃液老化模擬體系結(jié)論