黑米花青素的組成、對(duì)益生菌和致病菌的活性研究.pdf

1、本文主要研究了黑米花青素的組成成分、體外抗氧化、對(duì)腸道益生菌的增殖作用和致病菌的抑制作用及微膠囊化。首先，以黑米為原料制備黑米花青素粗提物，再通過(guò)HPLC-MS/MS技術(shù)分析黑米花青素的成分，之后研究花青素粗提物及其主要成分的體外抗氧化、對(duì)益生菌的增殖和對(duì)致病菌的抑制作用。最后基于花青素結(jié)構(gòu)容易受到pH、溫度、金屬離子等因素的影響，對(duì)黑米花青素進(jìn)行微膠囊化，并且比較其穩(wěn)定性的變化。主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:
　　1、黑米花青素的組分

2、分析。通過(guò)HPLC-MS/MS技術(shù)對(duì)黑米花青素成分進(jìn)行分析，確定了黑米花青素主要包括:矢車(chē)菊素-3,5-二葡萄糖苷、矢車(chē)菊素-飛燕草素-己糖苷、矢車(chē)菊素-3-葡萄糖苷(81.99％)、矢車(chē)菊素-3-蕓香糖苷、芍藥素-3-葡萄糖苷和芍藥素-3-蕓香糖苷六種組分。
　　2、花青素粗提物及矢車(chē)菊素-3-葡萄糖苷的體外抗氧化研究。以Vc為陽(yáng)性對(duì)照，分別采用DPPH法、水楊酸法、鄰苯三酚法、硫代巴比妥酸法和普魯士藍(lán)法，測(cè)定花青素粗提物和矢車(chē)

3、菊素-3-葡萄糖苷清除DPPH·、·OH和O2-·的能力，抗脂質(zhì)過(guò)氧化能力以及總還原力。結(jié)果表明，花青素粗提物的DPPH·、·OH和O2-·的清除能力，抗脂質(zhì)過(guò)氧化能力和總還原力分別為98.85、79.94、79.66及72.58％、0.271;矢車(chē)菊素-3-葡萄糖苷分別為98.98、90.57、81.92和75.54％、0.359; Vc分別為98.98、99.76、98.51和90.93％、0.580。而且在相同濃度下，矢車(chē)菊素-3

4、-葡萄糖苷對(duì)自由基的清除能力，抗脂質(zhì)氧化能力及還原力都要優(yōu)于花青素粗提物。
　　3、花青素粗提物和矢車(chē)菊素-3-葡萄糖苷對(duì)雙歧桿菌和乳酸桿菌的增殖作用研究。在對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)基中，分別加入不同濃度的花青素粗提物和矢車(chē)菊素-3-葡萄糖苷，接種不同的益生菌，進(jìn)行體外厭氧培養(yǎng)。36h后，測(cè)定培養(yǎng)基中的活菌數(shù)及其pH。結(jié)果顯示，二者對(duì)對(duì)嬰兒雙歧桿菌(B.infantis)、兩歧雙歧桿菌(B.bifidum)、青春雙歧桿菌(B.adolescen

5、tis)和嗜酸乳桿菌(L.acidophilus)均有顯著的增殖作用?；ㄇ嗨卮痔嵛飳?duì)嬰兒雙岐桿菌、青春雙歧桿菌、兩歧雙歧桿菌和嗜酸乳桿菌的最佳增殖濃度分別為2.0、1.0、1.0和1.5mg/mL;矢車(chē)菊素-3-葡萄糖苷對(duì)四種菌種的最佳增殖濃度分別為1.0、1.0、1.0和1.5 mg/mL。
　　4、花青素粗提物和矢車(chē)菊素-3-葡萄糖苷對(duì)致病菌的抑制作用研究。采用濾紙片法，以抑菌圈直徑大小為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，研究二者的抑菌活性，結(jié)果表明

6、，二者對(duì)兩種致病菌均有抑制作用且抑制作用隨著樣品濃度的增加而增強(qiáng)。在相同濃度下，樣品對(duì)沙門(mén)氏菌（salmonella）的抑制作用要強(qiáng)于對(duì)金黃色葡萄球菌(S.aureus)的抑制作用。
　　5、花青素的微膠囊化。采用銳孔-凝固浴法和β-環(huán)糊精包合法對(duì)花青素進(jìn)行微膠囊化。在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，進(jìn)行正交試驗(yàn)和驗(yàn)證試驗(yàn)，確定兩種方法的最佳工藝條件。銳孔-凝固浴法為海藻酸鈉2.00％、殼聚糖2.25％、壁芯比16∶1、針頭孔徑0.55 mm，

7、在此條件下，花青素包埋率為84.17％;β-環(huán)糊精包合法為攪拌時(shí)間1.75 h、β-環(huán)糊精添加量3.0％、乳化劑添加量1.75％、攪拌轉(zhuǎn)速660 r/min，在此條件下，花青素包埋率為26.87％。
　　6、研究花青素微膠囊在腸胃模擬液中的釋放以及微膠囊化對(duì)花青素穩(wěn)定性的影響。微膠囊化后的花青素能夠在胃模擬液中維持4.0 h，在腸道中隨著時(shí)間的延長(zhǎng)緩慢釋放;微膠囊化可以提高花青素在金屬離子（Ba2+、Cu2+、Zn2+、Al3+和