抑制引起腹瀉致病菌的益生菌篩選及機(jī)制初步研究.pdf

1、腹瀉是發(fā)展中國家導(dǎo)致兒童死亡的主要原因，每年有大約140萬-250萬的生命死于腹瀉。腹瀉除了直接引起健康的損傷外，還引起人體營養(yǎng)失調(diào)，生長速度減緩，智力發(fā)育等問題。盡管在發(fā)達(dá)國家腹瀉導(dǎo)致死亡的的情況并不經(jīng)常發(fā)生，但是腹瀉仍然是引起普通疾病的主要原因，而且還消耗了大量的醫(yī)療費(fèi)用。我們篩選能夠抑制引起腹瀉致病菌的益生菌，這些益生菌對于預(yù)防腹瀉發(fā)揮重要的作用，益生菌配合藥物治療腹瀉既能夠使腹瀉快速康復(fù)，又能夠保護(hù)腸道菌群免受藥物的破壞。用益生

2、菌預(yù)防和治療腹瀉還能夠有效地降低醫(yī)療費(fèi)用，減輕醫(yī)療負(fù)擔(dān)。
　　從健康成人腸道中分離腸道益生菌。采集糞便樣本，稀釋之后用RB、CAN和LAM培養(yǎng)基分離出39株益生菌，其中15株雙歧桿菌、14株乳酸球菌和10株乳酸桿菌。然后以致病性大腸桿菌（E.coli）作為指標(biāo)菌株對這39株益生菌進(jìn)行抑菌篩選，發(fā)現(xiàn)乳酸球菌對于致病性大腸桿菌沒有抑制作用，大部分雙歧桿菌和乳桿菌有抑菌作用。對于剩余的具有抑菌能力的益生菌菌液上清進(jìn)行中和，發(fā)現(xiàn)大部分益生

3、菌喪失抑菌能力，僅有三株益生菌具有較強(qiáng)的抑菌活性，最后通過過氧化氫酶試驗(yàn)和蛋白酶檢測試驗(yàn)確定1321、0533和1333這三株菌，不僅能夠代謝產(chǎn)生各種酸抑菌，還能夠產(chǎn)生抗菌肽抑制致病菌的生長。最后通過蛋白質(zhì)純化儀對于益生菌代謝產(chǎn)物中的抗菌肽進(jìn)行分離純化。
　　篩選出能夠抑制致病菌的益生菌后還要對益生菌的耐酸、耐膽鹽和黏附能力進(jìn)行篩選，因?yàn)橹挥幸嫔軌蚰褪苋梭w胃和腸道的復(fù)雜環(huán)境，順利黏附到人體小腸上皮細(xì)胞上才能發(fā)揮作用。最后對于益