抗HIV雙載藥雙頭基兩親前藥自組裝體的研究.pdf

1、自組裝藥物傳遞系統(tǒng)[1，2](SADDS)是指具有一定兩親性的藥物或前藥在水溶液中自組裝成膠束、囊泡、六角相、立方相等高度分散的聚集體。自組裝藥物傳遞系統(tǒng)的兩親性使其對(duì)生物膜有很好的親和性和透過性：微粒分散特性使其在體內(nèi)有靶向性、粘附性。因此，自組裝藥物傳遞系統(tǒng)可以高效地將藥物傳遞至靶器官、組織和細(xì)胞中。它和普通藥物傳遞系統(tǒng)(DDS)的區(qū)別是SADDS全部或大部分單體成分由藥物本身構(gòu)成，載藥量大大增加，在體內(nèi)也更穩(wěn)定。 雙頭基兩

2、親前藥自組裝體系(SASBP)是自組裝藥物傳統(tǒng)系統(tǒng)的新進(jìn)展，是將兩個(gè)藥物分子(相同或不同)共價(jià)連接在脂肪鏈兩端制備成雙頭基兩親前藥并得到其自組裝體系。它除具備上述SADDS的優(yōu)點(diǎn)外，還具有前藥分子雙重緩釋、可實(shí)現(xiàn)體內(nèi)“雞尾酒”療法、自組裝體系更加穩(wěn)定的特點(diǎn)。 本文以水溶性核苷類似物抗HIV藥物齊多夫定(AZT)和去羥肌苷(DDI)為模型藥物，將AZT和DDI親脂衍生化后得到抗HIV雙載藥雙頭基兩親前藥(ZPDD)，制備其自組裝體

3、，并考察其體內(nèi)外行為的一般規(guī)律。具體研究容包括： 1.抗HIV雙載藥雙頭基兩親前藥的合成及性質(zhì) 設(shè)計(jì)并合成了抗HIV雙載藥雙頭基兩親前藥：齊多夫定單磷?；パ跄懰崛チu肌苷(ZPDD)，并對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行確證?？疾炝饲八幍娜芙庑?，以及Langmuir單分子膜的性質(zhì)。去羥肌苷和齊多夫定經(jīng)去氧膽酸衍生化后親脂性大大增強(qiáng)，氫鍵和疏水相互作用是決定ZPDD溶解性的關(guān)鍵因素；前藥ZPDD分子的成膜性較好，由于疏水鏈去氧膽酸糖基酯的剛性較

4、強(qiáng)，推測(cè)ZPDD分子在氣液界面的排列方式為拉伸構(gòu)型。 2.抗HIV雙載藥雙頭基兩親前藥自組裝體的制備及結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 用四氫呋喃(THF)將前藥溶解，采用注入法制備得到了高度分散、均勻穩(wěn)定的ZPDD自組裝體。透射電子顯微鏡和激光粒度分析儀觀察其形態(tài)、粒徑和Zeta電位，自組裝體為類球形囊泡，平均粒徑為175nm，Zeta電位-44.4mV。分析ZPDD自組裝體形成的機(jī)理為：ZPDD分子在去氧膽酸糖基酯基團(tuán)的疏水相互作用和核苷基

5、團(tuán)的氫鍵作用下自發(fā)排列成單分子層結(jié)構(gòu)，在機(jī)械力的作用下彎曲形成類球形囊泡。 3.抗HIV雙載藥雙頭基兩親前藥自組裝體的物理穩(wěn)定性 考察高溫、高壓、離心沉降、室溫長期放置等對(duì)ZPDD自組裝體穩(wěn)定性的影響。結(jié)果顯示高溫、高壓對(duì)自組裝體的粒徑無影響，但前藥的含量急劇下降；高速離心(≤10000rpm)自組裝體粒徑無變化，粒子不易聚集；室溫放置ZPDD自組裝體能長期保持穩(wěn)定。 4.抗HIV雙載藥雙頭基兩親前藥自組裝體的化

6、學(xué)穩(wěn)定性 以HPLC為含量測(cè)定方法，考察了ZPDD自組裝體在不同pH緩沖液、不同動(dòng)物血漿、以及小鼠組織勻漿中的降解情況。結(jié)果表明：ZPDD在pH2.0的緩沖液中很快降解；pH5.5環(huán)境下相對(duì)穩(wěn)定，t1/2為61h；在pH7.4環(huán)境中能長時(shí)間保持穩(wěn)定，t1/2>1000h。而ZPDD自組裝體在不同種屬動(dòng)物血漿中的降解速率有所差異，其中在小鼠和人血漿中降解較快，在狗、猴、大鼠血漿中降解緩慢。ZPDD自組裝體在小鼠肝組織勻漿中降解較快

7、，t1/2為3h。在不同種屬動(dòng)物血漿和小鼠肝組織勻漿中，ZPDD自組裝體的降解產(chǎn)物主要是AZT和DDI，但檢測(cè)到的DDI很少，推測(cè)DDI進(jìn)一步降解為次黃嘌呤。ZPDD自組裝體在不同種屬動(dòng)物血漿及小鼠肝組織勻漿中的穩(wěn)定性結(jié)果表明：ZPDD前藥能夠有效的降解出原型藥物，并且在體內(nèi)可能有緩釋效果。 5.抗HIV雙載藥雙頭基兩親前藥自組裝體的體外初步藥效學(xué) 在體外細(xì)胞模型上抗HIV實(shí)驗(yàn)證明，ZPDD自組裝體抗HIV-1 IIIB

8、病毒效果與陽性對(duì)照藥AZT相同，半數(shù)有效濃度(EC50)為.5nmol/L。結(jié)果表明，ZPDD自組裝體進(jìn)入細(xì)胞后可以有效的降解、釋放出原型藥物，發(fā)揮抗病毒作用。 6.自組裝體在動(dòng)物體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)和組織分布 ZPDD自組裝體于小鼠靜脈、口服和腹膜內(nèi)給藥后迅速從血液向各主要組織(淋巴結(jié)、胸腺、肝、脾、肺)分布，具有明顯的淋巴系統(tǒng)和單核巨噬細(xì)胞靶向性。上述三種給藥方式在小鼠血漿的t1/2分別為18min、16min和28m

9、in；口服給藥ZPDD的生物利用度為30.8％，腹膜內(nèi)給藥ZPDD的生物利用度為86.5％。但ZPDD到達(dá)靶器官后能較快降解出原型藥物AZT，檢測(cè)到的另一原型藥物DDI的量較少。但以上三種給藥途徑中，AZT和DDI的生成量接近，并且無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果表明ZPDD自組裝體具有明顯的淋巴系統(tǒng)和單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)靶向性，在靶器官中能較快降解出原型藥物進(jìn)而發(fā)揮藥效。 本文設(shè)計(jì)、篩選并制備得到了高度分散、均勻、穩(wěn)定的ZPDD自組裝體，證明了