皮膚重疊擴(kuò)張的極限以及相關(guān)組織學(xué)變化的研究.pdf

1、目的：觀察實(shí)驗(yàn)動物皮膚經(jīng)重疊擴(kuò)張(overlappingtissueexpansion)達(dá)到極限擴(kuò)張(extrematissueexpansionETE)狀態(tài)時(shí)的皮膚擴(kuò)張率、即時(shí)回縮率、皮膚厚度及組織學(xué)變化，將結(jié)果與常規(guī)擴(kuò)張(routinetissueexpansionRTE)對比，以確定皮膚軟組織的最大擴(kuò)張率，推斷限制皮膚擴(kuò)張面積的因素。為臨床進(jìn)一步探索能夠充分利用供區(qū)皮膚軟組織的最佳擴(kuò)張方法提供理論依據(jù)。 方法： 1

2、試驗(yàn)動物 白色小家豬六頭雌雄不限，稱重編號。 2分組 于每頭小家豬背部脊柱兩側(cè)設(shè)計(jì)4個(gè)對稱分布的擴(kuò)張區(qū)，共計(jì)24個(gè)擴(kuò)張區(qū)，分為2組，極限擴(kuò)張組(ETE組)和常規(guī)擴(kuò)張組(RTE組)，于擴(kuò)張區(qū)相似部位未擴(kuò)張?zhí)幦≌Ｆつw作為空白對照組(blankcontrolgroupBC組)。氯胺酮(20mg/kg)肌肉注射全身麻醉下在實(shí)驗(yàn)動物背部皮下淺筋膜深層埋植一枚或多枚皮膚軟組織擴(kuò)張器，在擴(kuò)張皮瓣區(qū)文刺黑色方格，邊長2cm，至

3、埋置擴(kuò)張器的腔隙邊緣外13～15cm。 3擴(kuò)張器植入及注水方法 ETE組植入兩枚擴(kuò)張器分別為70ml和50ml，重疊放置；RTE組常規(guī)植入70ml擴(kuò)張器一枚。實(shí)驗(yàn)動物待切口愈合拆線后，擴(kuò)張方法采用常規(guī)擴(kuò)張：每3～5d氯胺酮(20mg/kg)肌肉注射麻醉下注水一次，每次注水量根據(jù)擴(kuò)張皮瓣松弛度及擴(kuò)張器的容積而定，以皮瓣指壓反應(yīng)4～5s為限。ETE組注水直至項(xiàng)部擴(kuò)張區(qū)皮膚呈現(xiàn)菲薄透明、血運(yùn)障礙、彈力明顯下降為止；RTE組擴(kuò)張

4、區(qū)注水至擴(kuò)張器額定容量72h后取材。 4取材 氯胺酮20mg/kg、安定1.5mg/kg、阿托品0.01mg/kg肌肉注射麻醉下將完成擴(kuò)張的皮瓣項(xiàng)部最充分?jǐn)U張部分切取送檢。同時(shí)取相似部位未經(jīng)擴(kuò)張的正常皮膚作為對照，取下的標(biāo)本分為兩部分，分別以4％中性戊二醛和中性甲醛固定，送透射電鏡檢查和制作石蠟切片。其中石蠟切片分別作常規(guī)HE染色、維多利亞藍(lán)染色。 5觀測指標(biāo) (1)擴(kuò)張率：待擴(kuò)張完成后，以無彈性的棉布按

5、照方格大小形狀裁剪成布樣，并將棉布圖樣描繪在硫酸紙上，通過硫酸紙稱重間接反映其擴(kuò)張面積與周邊未經(jīng)擴(kuò)張區(qū)域的自然生長面積，計(jì)算皮瓣不同部位擴(kuò)張率的變化。(2)即時(shí)回縮率：于各組擴(kuò)張皮瓣項(xiàng)部取1cm×1cm皮瓣計(jì)算即時(shí)回縮率，同時(shí)取相鄰部位未經(jīng)擴(kuò)張的正常皮膚作為對照。(3)光鏡下觀察常規(guī)HE染色切片的組織學(xué)變化，并應(yīng)用顯微標(biāo)尺測量標(biāo)本的真皮和表皮厚度；光鏡下觀察維多利亞藍(lán)染色切片，比較各組標(biāo)本真皮中膠原纖維、彈力纖維的組成變化。(4)透射電

6、鏡下觀察表皮基底層和棘細(xì)胞層中的橋粒及半橋粒的變化、真皮中基質(zhì)及成纖維細(xì)胞的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)變化，對比各組之間的異同。 6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPASS11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理軟件，對試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 結(jié)果： 1擴(kuò)張比率 ETE組擴(kuò)張率為(508.91±82.99)％，RTE組擴(kuò)張率為(110.86±14.6)％，ETE組擴(kuò)張率大于RET組359.5％(P＜0.05)。 2即時(shí)回縮率 ET

7、E組即時(shí)回縮率為(17.56±1.65)％，RTE組即時(shí)回縮率為(34.24±1.06)％，BC組即時(shí)回縮率為(21.13±0.86)％。各組間兩兩比較均有顯著性差異(P＜0.05)。 3光鏡觀察 3.1HE染色及真皮、表皮厚度測定 光鏡下放大100倍可見ETE組真皮層內(nèi)可見廣泛毛細(xì)血管出血，此現(xiàn)象在RTE組中未見。BC組真皮層厚度為2.393±0.128mm，表皮層厚度為0.09±0.0019mm。RTE組真皮

8、層厚度為1.929±0.132mm，與BC組相比降低19.39％(P＜0.05)；表皮層厚度為0.188±0.0030mm，較BC組增厚108.89％(P＜0.05)。ETE組真皮層厚度與BC組皮膚相比降低79.57％(P＜0.05)，與RTE組皮膚相比厚度減低75％(P＜0.05)；表皮層厚度為0.180±0.0036mm較BC組皮膚增厚100％(P＜0.05)，但于RTE組相比無顯著差異(P＞0.05)。 3.2維多利亞藍(lán)染

9、色 RTE組膠原纖維較正常組細(xì)小、間距擴(kuò)大；ETE組膠原纖維更加細(xì)小，間距進(jìn)一步擴(kuò)大。RTE組彈力纖維增生；ETE組則含量減低且廣泛斷裂。 4電鏡觀察 ETE組表皮基底細(xì)胞和真皮中成纖維細(xì)胞的線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等超微結(jié)構(gòu)發(fā)生了明顯的病理改變，并可見壞死灶散在分布。而RTE組中超微結(jié)構(gòu)改變輕微，兩組間對比差別顯著。 結(jié)論：采用重疊擴(kuò)張術(shù)可使皮膚達(dá)到擴(kuò)張極限，當(dāng)皮膚達(dá)到擴(kuò)張極限時(shí)，出現(xiàn)一系列特有的病理改變。由