虎杖有效組分提取分離及白藜蘆醇分析方法研究.pdf

1、針對(duì)虎杖白藜蘆醇提取效率低、提取后藥材殘?jiān)寐实?、產(chǎn)品附加值低等問題，本文對(duì)虎杖藥用組分進(jìn)行發(fā)掘，為虎杖藥材殘?jiān)某浞掷锰峁┲С?，根?jù)生產(chǎn)中白藜蘆醇的檢測(cè)需求，建立相應(yīng)的樣本檢測(cè)方法，用來指導(dǎo)工藝改進(jìn)、降低生產(chǎn)成本，為白藜蘆醇提取率、產(chǎn)品附加值的提高提供借鑒。
　　 本文以水為溶劑，采用微波提取方式，經(jīng)萃取分段過程，重點(diǎn)對(duì)水提取液乙酸乙酯萃取相浸膏進(jìn)行綜合分離，經(jīng)過反復(fù)柱層析、制備薄層層析、重結(jié)晶等過程得到十種單體化合物，通

2、過TLC、IR、NMR等技術(shù)鑒定出大黃素等七種成分，這些成分多具有抗炎、抗菌活性，具有一定的開發(fā)價(jià)值，可以為白藜蘆醇提取后虎杖殘?jiān)木C合開發(fā)和利用提供借鑒。
　　 本文通過繪制白藜蘆醇紫外標(biāo)準(zhǔn)加入曲線實(shí)現(xiàn)了對(duì)虎杖甲醇提取物中白藜蘆醇的分析檢測(cè)，結(jié)果顯示該樣本中白藜蘆醇提取率為0.18％，本方法操作簡(jiǎn)單，測(cè)試成本低，測(cè)試精度高，可借此實(shí)現(xiàn)提取過程的工藝優(yōu)化。利用HPCE分析技術(shù)對(duì)虎杖甲醇提取物中白藜蘆醇進(jìn)行檢測(cè)，在優(yōu)化的分離條件下

3、，白藜蘆醇響應(yīng)峰遷移時(shí)間為7.121min，通過對(duì)梯度濃度白藜蘆醇峰面積數(shù)據(jù)的采集建立白藜蘆醇HPCE檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=86591x+1805.7，R2=0.993，線性范圍在0.05～0.80mg/mL之間，線性程度較好，應(yīng)用至虎杖甲醇提取物的白藜蘆醇檢測(cè)，其含量為0.3598mg/L，對(duì)UV法檢測(cè)的相對(duì)誤差為1.49％。該方法實(shí)現(xiàn)了虎杖苷和白藜蘆醇的基線分離(R=1.71)，可實(shí)現(xiàn)虎杖苷水解工藝的優(yōu)化檢測(cè)。基于化學(xué)發(fā)光和微流控芯

4、片檢測(cè)原理，設(shè)計(jì)、搭建微流控芯片化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)，建立光強(qiáng)變化與白藜蘆醇添加濃度之間關(guān)系曲線，曲線在1.0×10-9mol/L～1.0×10-5mol/L范圍內(nèi)呈良好指數(shù)關(guān)系，將該方法應(yīng)用至合成樣本的分析，檢測(cè)結(jié)果與UV、HPCE檢測(cè)相當(dāng)。該方法利用芯片上微管道作為反應(yīng)場(chǎng)所，試劑、樣品量少，分析快速、可同時(shí)實(shí)現(xiàn)抗自由基活性和含量檢測(cè)。
　　 利用所建的白藜蘆醇和虎杖苷的HPCE檢測(cè)方法對(duì)虎杖苷酸水解及酶水解樣本進(jìn)行分析，比較兩種工藝

5、的水解效率。其中酸環(huán)境下水解1h后白藜蘆醇的含量即達(dá)到最高，濃度為197.36mg/L，虎杖苷水解率達(dá)到了62.87％。而酵母生長(zhǎng)緩慢，24h白藜蘆醇的含量才達(dá)到最高，其濃度為123.32mg/L，虎杖苷水解率為35.33％。酶水解反應(yīng)速度慢，但條件溫和，對(duì)白藜蘆醇的破壞較小，在工業(yè)生產(chǎn)中仍然占主體地位。酸環(huán)境水解過程中較高的溫度以及大量H+的存在會(huì)催化白藜蘆醇的醇加成反應(yīng)，致使白藜蘆醇的濃度減少且該過程對(duì)設(shè)備要求高，但該過程具有反應(yīng)速

6、度快、水解效率高的特點(diǎn)，可以對(duì)反應(yīng)時(shí)間進(jìn)行嚴(yán)格控制或者利用雙相酸水解的方法對(duì)產(chǎn)生的白藜蘆醇進(jìn)行保護(hù)，應(yīng)用前景較好。
　　 本文具有特色的研究體現(xiàn)在：第一，對(duì)虎杖水提取物乙酸乙酯萃取層進(jìn)行綜合提取，提取出七種化合物，多具有抗炎、抗菌、抗氧化活性，為虎杖的綜合利用提供指導(dǎo)；第二，研究了三種白藜蘆醇的分析檢測(cè)方法，可以分別對(duì)應(yīng)用于提取物中、水解工藝中及產(chǎn)品中自藜蘆醇的進(jìn)行測(cè)試。第三，利用所建虎杖苷和白藜蘆醇HPCE檢測(cè)方法對(duì)虎杖苷水解