電針對Ghrelin介導(dǎo)的FD大鼠腦腸軸失衡調(diào)節(jié)作用的實驗研究.pdf

1、目的：以Ghrelin介導(dǎo)的腦腸軸失衡機制為中心，觀察電針對FD模型大鼠一般情況評分、胃殘留量和小腸墨汁推進(jìn)率、腦腸肽Ghrelin及其受體在胃竇、下丘腦和海馬組織的表達(dá)。探討Ghrelin在FD發(fā)病中的作用以及電針對Ghrelin介導(dǎo)的FD大鼠腦腸軸失衡的調(diào)節(jié)作用。
　　方法：選取體重為180±20g的SPF級SD大鼠80只。實驗前所有大鼠置于鼠籠常規(guī)適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，隨機數(shù)字表法將80只大鼠隨機分為正常對照組、模型對照組、藥物

2、干預(yù)組和電針干預(yù)組，每組20只。正常對照組造模期間遠(yuǎn)離造模環(huán)境，避免造模環(huán)境干擾，余三組大鼠采用夾尾造模法復(fù)制FD模型大鼠。治療階段，正常對照組和模型對照組大鼠每日定時抓捕，不進(jìn)行任何其它處理；藥物干預(yù)組大鼠采用西沙比利片稀釋的西沙比利溶液灌胃治療，日一次，連續(xù)治療6次為一個療程，休息一天后進(jìn)入第二個療程，共治療2個療程；電針干預(yù)組大鼠每日針刺雙側(cè)“足三里”穴（直刺0.3-0.5寸）和“太沖”穴（斜刺0.1-0.2寸），快速捻轉(zhuǎn)至針下沉

3、澀感后，接韓式穴位神經(jīng)刺激儀：等幅疏密波、頻率2/15Hz、強度2mA，部分大鼠可見以下肢輕微顫抖。每次30min，日一次，連續(xù)治療6次為一個療程，休息一天后進(jìn)入第二個療程，共治療2個療程。觀察電針對FD大鼠一般情況評分、體重日增長、進(jìn)食、飲水量、胃內(nèi)殘留率、小腸墨汁推進(jìn)率相關(guān)指標(biāo)；運用顯微鏡觀察胃竇平滑肌組織病理形態(tài)學(xué)；采用酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測血漿Ghrelin濃度值；運用免疫組化法觀察各組大鼠胃、下丘腦和海馬Ghrelin蛋白的表

4、達(dá)；采用實時定量熒光PCR法觀察各組大鼠胃、下丘腦和海馬GHS-R mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：（1）和正常對照組相比，F(xiàn)D模型大鼠在造模階段一般情況評分、日增長體重、日進(jìn)食量、日飲水量均明顯下降（P<0.01）；在治療階段，通過電針和藥物治療后，電針干預(yù)組和藥物干預(yù)組大鼠一般情況評分、日增長體重、日進(jìn)食量、日飲水量均較前增加，和同組造模階段相比有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05，P<0.01）；而且，電針干預(yù)組大鼠日增長體重較藥物干預(yù)組

5、進(jìn)一步增加（P<0.01）。（2）各組大鼠胃腸組織形態(tài)學(xué)未發(fā)現(xiàn)器質(zhì)性改變，肉眼觀察僅模型對照組胃黏膜顏色偏白，余三組胃組織黏膜未見潰瘍、出血或炎癥反應(yīng)，在光鏡下檢查（×400）發(fā)現(xiàn)僅模型對照組胃組織有少許中性粒細(xì)胞。（3）和正常對照組相比，F(xiàn)D模型大鼠胃內(nèi)殘留率增加（P<0.05），小腸墨汁推進(jìn)率下降（P<0.01），與模型組比較，電針干預(yù)組和藥物干預(yù)組大鼠胃內(nèi)殘留率均明顯減少（P<0.01），小腸墨汁推進(jìn)率明顯上升（P<0.01），電

6、針干預(yù)組和藥物干預(yù)組組間比較差異沒有顯著性。（4）和正常對照組相比，F(xiàn)D模型大鼠外周血漿、胃、中樞下丘腦和海馬組織中Ghrelin濃度均下降（P<0.05），電針可以上調(diào)FD模型大鼠外周血漿、胃組織、中樞下丘腦和海馬組織中Ghrelin含量（P<0.05、P<0.01），但藥物西沙比利溶液僅能上調(diào)FD大鼠胃和海馬組織中Ghrelin含量（P<0.05），不能上調(diào)大鼠外周血漿、中樞下丘腦和Ghrelin含量（P>0.05）。（5）與正常對

7、照組比較，F(xiàn)D模型大鼠胃、下丘腦和海馬組織GHS-R mRNA表達(dá)均下降（P<0.05）；與模型對照組比較，藥物干預(yù)組和電針干預(yù)組胃組織、下丘腦組織、海馬組織GHS-R mRNA表達(dá)上升明顯（P<0.05）；與藥物干預(yù)組比較，電針能明顯促進(jìn)海馬組織GHS-R mRNA表達(dá)。
　　結(jié)論：（1）夾尾法復(fù)制FD大鼠一般情況評分、體重日增長和日進(jìn)食量降低，胃內(nèi)殘留率增加，小腸墨汁推進(jìn)率下降，外周血漿、胃黏膜、下丘腦和海馬組織中Ghreli

8、n濃度、胃、下丘腦和海馬組織GHS-R mRNA表達(dá)均下降。FD大鼠腦腸軸這座橋梁上的信使之一Ghrelin及其受體表達(dá)低于正常，Ghrelin參與了FD大鼠腦腸軸失衡。
　?。?）電針和西沙比利溶液均能有效改善FD大鼠的一般情況評分、促進(jìn)進(jìn)食和體重日增長、促進(jìn)胃排空和小腸推動力，在改善一般情況評分和體重日增長方面電針明顯優(yōu)于西藥組，為電針替代西藥治療FD提供實驗依據(jù)。
　　（3）電針可顯著促進(jìn)FD大鼠外周血漿、胃組織、中樞

9、下丘腦、海馬組織中Ghrelin蛋白表達(dá)，而西沙比利僅能促進(jìn)外周胃組織和中樞海馬組織Ghrelin蛋白表達(dá)，對FD大鼠外周血漿、下丘腦Ghrelin蛋白表達(dá)沒有影響，提示電針對Ghrelin的調(diào)控是多方面的，優(yōu)于藥物干預(yù)組。
　?。?）電針和西沙比利溶液都可顯著促進(jìn)FD大鼠胃、下丘腦和海馬組織Ghrelin受體（GHS-R）mRNA的表達(dá)，但在調(diào)節(jié)海馬組織Ghrelin受體（GHS-R）mRNA的表達(dá)方面，電針組優(yōu)于西沙比利組