同源盒基因在白血病發(fā)病中的作用.pdf

1、上海第二醫(yī)科大學碩士學位論文同源盒基因在白血病發(fā)病中的作用姓名：王晴申請學位級別：碩士專業(yè)：內科學（血液學）指導教師：陳賽娟2003.5.1充分利用當前人類基因組研究所取得的大量信息，定位竟隆粱色體t(11；12)(p15：q13)易位的受累基因，進而對所克隆的基因進行了初步的功能分析。我們對三例伴t(11：12)(P15；q13)易位的有明確分型的原發(fā)性急性髓系白血病成年病人進行了深入研究，采取了定位侯選克隆的策略，以確定此種易位的受

2、累基因。我們先通過常規(guī)的細胞遺傳學方法檢測出了病人骨髓細胞中的染色體t(11：12)(P15：q13)易位。我們又通過染色體涂抹技術(CromosomePainting)證實了11號染色體和12號染色體之間的易位。隨后用分子細胞遺傳學的FISH技術通過篩查位于染色體1lpl5的不同的克隆檢測到了斷裂點位于染色體11P15的NUP98基因的3’端。此后，我們又通過cDNA末端快速擴增技術(RapidAmplificationofcDNAE

3、nds，RACE)發(fā)現(xiàn)了位于染色體12q13的伙伴基因HOXCll。我們所發(fā)現(xiàn)的三例伴t(11：12)(P15：q13)易位的病人的分子生物學分析均顯示NUP98基因的12號外顯子與HOXCll基因的2號外顯子相融合，斷裂點分別位于NUP98基因的內含子12和HOXCll的內含子1。此前，日本人所發(fā)現(xiàn)的一例伴染色體t(11：12)(p15：q13)易位的小兒AML患者的分子生物學分析顯示NUP98基因的12號外顯子與HOXCll基因的1

4、號外顯子相融合。因此，我們所發(fā)現(xiàn)的3例成人AML中的融合方式代表了迄今為止NUP98HOXCll嵌合體的主要類型。大多數(shù)染色體易位為交互易位或平衡易位，而非交互易位或非平衡易位較為少見。特別需要指出的是，3例病人中的兩例有染色體11p15的NUP98基因斷裂點3’端至染色體端粒末端在分子細胞遺傳學水平的缺失。因此，我們推測，大多數(shù)伴染色體t(11：12)(P15：q13)易位的病人應為不平衡易位。我們的研究中所發(fā)現(xiàn)的缺失部分包含一組位于