雌激素干預(yù)體外培養(yǎng)肝細(xì)胞對(duì)膽酸分泌及ABCG5和ABCG8表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　 研究雌二醇(E2)對(duì)體外培養(yǎng)人胎肝細(xì)胞株(L-02)，膽汁酸分泌及三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G5(ABCG5)和三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G8(ABCG8)表達(dá)的影響。探討雌激素對(duì)ABCG5和ABCG8表達(dá)的影響在妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥中的作用。
　　 方法:
　　 應(yīng)用雌激素作用于體外培養(yǎng)的人胎肝細(xì)胞，用ELISA法檢測(cè)不同濃度雌激素與肝細(xì)胞培養(yǎng)不同時(shí)間后培養(yǎng)基上清液中膽汁酸(TBA)的含量，并應(yīng)用Real

2、-TimePCR測(cè)定肝細(xì)胞ABCG5mRNA和ABCG8mRNA表達(dá)量。
　　 結(jié)果:
　　 1.對(duì)照組與體外肝細(xì)胞培養(yǎng)8h、24h后，TBA分泌水平分別為(5.92±0.65)、(6.25±0.21)umol/L;肝細(xì)胞ABCG5mRNA表達(dá)量分別為(1.76±0.08)、(1.78±0.24);肝細(xì)胞ABCG8mRNA表達(dá)量分別為(1.73±0.46)、(1.79±0.06)。TBA水平、肝細(xì)胞ABCG5mRNA和A

3、BCG8mRNA表達(dá)量，8h與24h比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2.雌激素濃度為10nmol/L與體外肝細(xì)胞培養(yǎng)8h、24h后，TBA分泌水平分別為(5.89±0.82)、（6.18±0.13）umol/L;ABCG5mRNA表達(dá)量分別為(1.77±0.56)、(1.72±0.3);ABCG8mRNA表達(dá)量分別為(1.73±0.32)、（1.76±0.21）。隨著雌激素作用時(shí)間的延長(zhǎng)，TBA水平、肝細(xì)胞AB

4、CG5mRNA和ABCG8mRNA表達(dá)量，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 3.雌激素濃度為100nmol/L與體外肝細(xì)胞培養(yǎng)8h、24h后TBA分泌水平分別為(5.72±0.58)、(5.78±0.45)umol/L;ABCG5mRNA表達(dá)量分別為(1.69±0.27)、(1.58±0.32);ABCG8mRNA表達(dá)量分別為(1.66±0.44)、(1.44±0.15)。隨著雌激素作用時(shí)間的延長(zhǎng)，TBA水平有升高趨勢(shì)

5、，而肝細(xì)胞ABCG5mRNA和ABCG8mRNA表達(dá)量有降低趨勢(shì)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 4.雌激素濃度為500nmol/L與體外肝細(xì)胞培養(yǎng)8h、24h后TBA分泌水平分別為(5.32±0.39)、(5.49±0.09)umol/L;肝細(xì)胞ABCG5mRNA表達(dá)量分別為(1.36±0.56)、(1.33±0.07);肝細(xì)胞ABCG8mRNA表達(dá)量分別為（1.57±0.27）、（0.95±0.02）。隨著雌激素

6、作用時(shí)間的延長(zhǎng)，TBA水平有升高趨勢(shì)，而肝細(xì)胞ABCG5mRNA和ABCG8mRNA表達(dá)量有降低趨勢(shì)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 5.雌激素濃度分別為0、10、100、500nmol/L時(shí)與體外肝細(xì)胞培養(yǎng)8h及24h時(shí)后，肝細(xì)胞TBA分泌水平及肝細(xì)胞ABCG5mRNA表達(dá)量和ABCG8mRNA表達(dá)量，隨著雌激素濃度的升高有逐漸降低趨勢(shì)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。但是，當(dāng)雌激素濃度為10nmol/L時(shí)與對(duì)

7、照組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。雌激素濃度為100nmol/L和500nmol/L時(shí)分別與對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)
　　 結(jié)論:
　　 1.低濃度雌激素不影響體外培養(yǎng)肝細(xì)胞TBA的分泌水平及ABCG5mRNA和ABCG8mRNA的表達(dá)。
　　 2.當(dāng)雌激素濃度達(dá)到一定水平時(shí)，肝細(xì)胞TBA分泌水平隨著雌激素濃度的增加有逐漸減少趨勢(shì)，隨著作用時(shí)間延長(zhǎng)有逐漸增加趨勢(shì);而肝細(xì)胞ABCG