生精散治療大鼠弱精子癥的實驗研究.pdf

1、目的:本實驗擬從兩個方面來研究生精散對弱精子癥的療效及其治療機理,旨在獲得科學(xué)規(guī)范的臨床資料,并闡明生精散的作用機制,為生精散治療弱精子癥不育提供科學(xué)的理論依據(jù),以期弘揚祖國醫(yī)學(xué)之精髓。本實驗對于深入研究精子特異性鈣通道蛋白CatSper在弱精子癥發(fā)生中的作用,進而闡明弱精子癥的發(fā)病機制,尋找新的臨床治療靶點也具有重要的價值。
　　方法:本實驗采用喂服GTW的方法誘導(dǎo)大鼠弱精子癥的發(fā)生,采用睪丸組織病理學(xué)檢測(H.E染色)、精液常

2、規(guī)分析和精子活力檢測的方法,檢測大鼠精子的形態(tài)與活力,建立弱精子癥大鼠模型,同時采用Real-timePCR(mRNA水平檢測)與免疫組化的方法,觀察四種CatSper通道蛋白(CatSper1-4)在模型大鼠精子質(zhì)膜上的表達的變化,試圖闡明以下問題:1.四種CatSper通道蛋白(CatSper1-4)在模型大鼠精子質(zhì)膜上的表達是否較對照組減少;2.生精散是否可以通過提高模型大鼠精子質(zhì)膜CatSper的表達、增強該通道的功能來提高精子

3、的活力。
　　結(jié)果:1.大鼠弱精子癥模型的建立采用喂服GTW的方法誘導(dǎo)大鼠弱精子癥的發(fā)生,采用睪丸組織病理學(xué)檢測(H.E染色)、精液常規(guī)分析和精子活力檢測的方法,檢測大鼠精子的形態(tài)與活力。結(jié)果表明:GTW組大鼠精子的活率、活力、密度以及直線運動速度(VSL)、平均路徑速度(VAP)和曲線運動速度(VCL)等功能指標均較正常對照組和NS組顯著降低。睪丸組織H.E染色顯示,模型組大鼠生精小管內(nèi)各級精母細胞和精子細胞數(shù)明顯減少,生精細胞

4、排列紊亂,表明GTW可以誘導(dǎo)穩(wěn)定的弱精子癥大鼠模型。2.弱精子癥大鼠是否有精子特異性鈣通道蛋白CatSper的表達減少通過免疫組織化學(xué)、Real-timePCR方法分別觀察(CatSper1-4)在模型大鼠精子質(zhì)膜上的表達是否較對照組減少。結(jié)果表明:模型組大鼠catsper蛋白表達明顯較對照組減少。為進一步研究弱精子癥的發(fā)生提供了基礎(chǔ)。3.生精散具有提高精子的密度、活力、活率及運動速度的作用。通過采用計算機輔助精子分析系統(tǒng)(comput

5、erassistedspermanalysis,CASA)檢測精子的密度、活力、活率、及運動速度等各項功能指標。結(jié)果:生精散可以明顯提高模型組精子的密度、活力、活率及運動速度,從而治療大鼠弱精子癥。
　　結(jié)論:1.GTW組大鼠精子的活率、活力、密度以及直線運動速度(VSL)、平均路徑速度(VAP)和曲線運動速度(VCL)等功能指標均較正常對照組和NS組顯著降低。睪丸組織H.E染色顯示,模型組大鼠生精小管內(nèi)各級精母細胞和精子細胞數(shù)明