Gli2和FoxM1在肝癌中的表達(dá)及其與臨床預(yù)后的關(guān)系.pdf

1、研究背景：
　　肝癌是人類(lèi)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,在全球惡性腫瘤發(fā)病率中排第五位,死亡率排第二位,每年約有69萬(wàn)患者死于肝癌[1]。肝癌分類(lèi)中以肝細(xì)胞癌占絕大多數(shù),導(dǎo)致原發(fā)性肝癌發(fā)生的原因主要包括病毒性、酒精性肝炎及肝硬化、黃曲霉素等,而在我國(guó)以慢性肝炎(主要是乙肝和丙肝)為主要病因。目前,肝癌的根治仍是以手術(shù)切除為主,并輔以其他的治療方法,如介入治療、化療、放療及分子靶向治療。因肝癌早期臨床癥狀不典型,就診時(shí)多處于終末期,且肝癌細(xì)

2、胞還具有對(duì)放化療不敏感且術(shù)后易復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的特點(diǎn),故造成肝癌患者總生存期較短。然而對(duì)于肝癌的復(fù)發(fā)、侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制目前研究還不是十分明確,且缺乏有效的預(yù)測(cè)肝癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的分子指標(biāo)。
　　Hedgehog信號(hào)通路在細(xì)胞生長(zhǎng)、胚胎形成及維持成人組織內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定方面扮演重要的作用。同時(shí)更多研究表明Hedgehog信號(hào)參與多種腫瘤的形成及發(fā)展,如基底細(xì)胞癌、消化道腫瘤、卵巢癌等。Gli作為Hedgehog信號(hào)通路的關(guān)鍵核轉(zhuǎn)錄因子,有研究報(bào)道 Gl

3、i2在肝癌中存在過(guò)表達(dá)并且與肝癌術(shù)后的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移存在密切聯(lián)系。FoxM1為Fox轉(zhuǎn)錄因子家族中的一種,其涉及細(xì)胞的多種生物過(guò)程,如細(xì)胞分化、遷移、侵襲、DNA損傷修復(fù)、組織內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)、血管形成、炎癥反應(yīng)等。因此,探索Gli2及FoxM1在肝癌發(fā)生、發(fā)展及術(shù)后復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的過(guò)程中所發(fā)揮的作用具有重要意義。
　　研究目的：
　　1.研究Hedgehog信號(hào)通路關(guān)鍵分子Gli2及FoxM1在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及其與臨床病理特征之間關(guān)系。

4、
　　2.分析Gli2、FoxM1與肝癌患者總生存期及無(wú)瘤生存期之間的關(guān)系。
　　3.探討Gli2-FoxM1對(duì)預(yù)測(cè)肝癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的臨床價(jià)值。
　　研究方法：
　　一、臨床樣本的選取
　　肝細(xì)胞癌組織及相應(yīng)的癌旁組織標(biāo)本來(lái)自于2008年1月至2012年1月在南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科所保存的手術(shù)切除下來(lái)的蠟塊組織,共92例。新鮮肝細(xì)胞癌及癌旁組織來(lái)源于科研中心標(biāo)本庫(kù)所保留的南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院普外科行肝癌切

5、除術(shù)時(shí)留取的冰凍樣本,共20例。臨床樣本要求來(lái)自滿(mǎn)18歲的成人,同時(shí)符合既往無(wú)其他腫瘤病史,術(shù)前未行任何放化療的原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者。留取樣本前向患者說(shuō)明樣本的用途,征得患者同意后再留取樣本。先于病理科查詢(xún)行肝癌切除術(shù)的患者,同時(shí)記錄該患者的病理資料,后于病案室查詢(xún)相關(guān)患者的臨床病例資料,最后對(duì)上述所有病人進(jìn)行隨訪(fǎng)。
　　二、原發(fā)性肝細(xì)胞癌中Gli2及FoxM1的檢測(cè)
　　將選取的92例標(biāo)本通過(guò)HE染色再次確認(rèn)其病理診斷,通過(guò)

6、免疫組織化學(xué)二步法及Western Blot方法檢測(cè)Hh信號(hào)通路重要組分蛋白Gli2及FoxM1的表達(dá);采用卡方檢驗(yàn)、秩和檢驗(yàn)、Spearman rank correlation分析檢驗(yàn)等統(tǒng)計(jì)方法分析原發(fā)性肝細(xì)胞癌中Gli2和FoxM1的表達(dá)與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。
　　三、隨訪(fǎng)
　　先于病理科查詢(xún)行肝癌切除術(shù)的患者,記錄該患者的病理資料(姓名、腫瘤分級(jí)、腫瘤最大徑、肝硬化、脈管侵犯),后于病案室查詢(xún)患者的臨床病例資料(住

7、院號(hào)、聯(lián)系方式、HBV感染、術(shù)前AFP、術(shù)后有無(wú)行TACE術(shù)),最后通過(guò)電話(huà)及查找患者入院復(fù)查相關(guān)資料等方式對(duì)上述所有病人進(jìn)行隨訪(fǎng),記錄在2013年6月以前,上述患者術(shù)后治療情況及復(fù)發(fā)、死亡時(shí)間。
　　研究結(jié)果：
　　一、Gli2在肝細(xì)胞癌中過(guò)表達(dá)及與臨床病理特征間的關(guān)系。
　　1.在92例原發(fā)性肝細(xì)胞癌組織中,Gli2高表達(dá)率為56.5％,而其相應(yīng)的正常組織中Gli2高表達(dá)率為4.5%,兩者差異具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

8、<0.001);肝細(xì)胞癌組織中Gli2的表達(dá)主要集中在細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)中,正常組織中Gli2的表達(dá)主要集中在細(xì)胞質(zhì)中。
　　2. Gli2在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤直徑、肝硬化、HBV感染、AFP及TNM分期均無(wú)明顯相關(guān)。
　　3. Gli2在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)與腫瘤的病理分級(jí)、脈管侵犯及BCLC分期均存在明顯相關(guān)。
　　二、FoxM1在肝細(xì)胞癌中過(guò)表達(dá)及與臨床病理特征間的關(guān)系。
　　1.在92例原發(fā)

9、性肝細(xì)胞癌組織中,FoxM1的高表達(dá)率為48.9%,而其相應(yīng)的正常組織中FoxM1的高表達(dá)率為11.9%,兩者差異具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001);肝細(xì)胞癌組織中 FoxM1的表達(dá)主要集中在細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)中,正常組織中FoxM1的表達(dá)主要集中在細(xì)胞質(zhì)中。
　　2. FoxM1在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)與患者的性別、年齡、肝硬化、HBV感染、AFP及TNM分期均無(wú)明顯相關(guān)。
　　3. FoxM1在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)與腫瘤直徑、病理分

10、級(jí)、脈管侵犯及BCLC分期存在明顯相關(guān)。
　　三、Gli2與FoxM1在肝細(xì)胞癌中相關(guān)性分析。
　　研究結(jié)果顯示,在Gli2陽(yáng)性表達(dá)的肝細(xì)胞癌中FoxM1的表達(dá)也呈陽(yáng)性,且兩者的表達(dá)呈現(xiàn)出一致性。Gli2與FoxM1蛋白在肝細(xì)胞癌組織中的表達(dá)呈現(xiàn)正相關(guān),兩者具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(R=0.288,P<0.05)。
　　四、Gli2及FoxM1蛋白與肝細(xì)胞癌患者預(yù)后的關(guān)系。
　　Gli2及FoxM1的表達(dá)與患者的總生存期和