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文檔簡介
1、目的:研究MOGS含藥血清對HSC-T6的毒性、增殖和抑制纖維合成的影響,并探討其抗肝纖維化的作用機(jī)制。
方法:設(shè)5%、10%和20%三個MOGS含藥血清劑量組,設(shè)細(xì)胞培養(yǎng)中大鼠血清含量為20%,不足的量用生理鹽水大鼠血清補(bǔ)齊。體外培養(yǎng)大鼠肝星狀細(xì)胞(HSC-T6),進(jìn)行以下試驗(yàn):
1、體外培養(yǎng)HSC-T6細(xì)胞,并以MOGS含藥血清干預(yù)。乳酸脫氫酶(LDH)法檢測 MOGS含藥血清對 HSC-T6的細(xì)胞毒性;MTT法
2、檢測MOGS含藥血清對HSC-T6的生長抑制作用。
2、流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期分布及細(xì)胞凋亡的變化。
3、Hyp測試盒測定細(xì)胞上清液中Hyp含量,放射免疫法測定細(xì)胞上清液中HA和LN含量。
4、RT-PCR法測定其對Col-I、TGF-β1及TIMP-1 mRNA表達(dá)的影響。
結(jié)果:1、乳酸脫氫酶檢測結(jié)果顯示,MOGS含藥血清對HSC-T6無特異毒性,MTT法檢測結(jié)果表明,MOGS含藥血清20%和
3、10%濃度組可顯著抑制HSC-T6的增殖(P<0.05或P<0.01)。
2、MOGS含藥血清各劑量組作用48 h后,HSC-T6細(xì)胞周期產(chǎn)生明顯變化,與NSs組對比均有顯著性差異(P<0.01)。流式細(xì)胞術(shù)檢測凋亡發(fā)現(xiàn),與NSs組相比,MOGS含藥血清各濃度組對HSC-T6細(xì)胞凋亡的影響皆有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01),且正常細(xì)胞比例呈劑量依賴性下降。
3、細(xì)胞上清液中相關(guān)指標(biāo)的測定發(fā)現(xiàn),MOGS含藥血清各濃度組細(xì)胞
4、上清液中 Hyp含量與 NSs組比較均存在顯著性差異(P<0.05或P<0.01);MOGS含藥血清20%和10%濃度組細(xì)胞上清液中HA和LN含量與 NSs組比較存在顯著性差異(P<0.05或 P<0.01),而5%濃度組對HA和LN含量無明顯影響(P>0.05)。
4、RT-PCR對HSC-T6相關(guān)基因的測定結(jié)果顯示,與NSs組比較,MOGS含藥血清20%和10%濃度組對Col-I、TGF-β1及TIMP-1 mRNA表達(dá)均
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