原花青素和姜黃素對(duì)慢性應(yīng)激誘導(dǎo)的學(xué)習(xí)記憶和神經(jīng)可塑性損傷的作用研究.pdf

1、目的:從行為學(xué)及腎上腺結(jié)構(gòu)和功能兩個(gè)層面切入,在慢性不可預(yù)知性溫和應(yīng)激模型中,觀察并比較姜黃素和原花青素對(duì)此模型所致學(xué)習(xí)記憶損傷的影響；進(jìn)一步從神經(jīng)保護(hù)和神經(jīng)可塑性兩方面探討姜黃素改善慢性應(yīng)激誘導(dǎo)的學(xué)習(xí)記憶損傷的機(jī)制。
　　 方法:①采用慢性不可預(yù)知性應(yīng)激模型,連續(xù)給予姜黃素和原花青素21天灌胃。末次給藥后,分批進(jìn)行Morris水迷宮和Open Field開野實(shí)驗(yàn)；采用常規(guī)HE染色觀察大鼠腎上腺病理變化。
　　 ②采用慢

2、性不可預(yù)知性應(yīng)激模型,連續(xù)給予姜黃素和原花青素21天灌胃。末次給藥后,斷頭取腦。采用快速高爾基染色法觀察海馬神經(jīng)元的結(jié)構(gòu)；免疫組織化學(xué)測(cè)定海馬Cu/Zn SOD活性。
　　 ③采用原代培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元模型,應(yīng)用皮質(zhì)酮誘導(dǎo)細(xì)胞損傷。LDH法測(cè)定神經(jīng)元活力；用熒光探針測(cè)定海馬神經(jīng)元活性氧簇；Real time RT-PCR法測(cè)定海馬神經(jīng)元NMDA-R2A和Grik2受體mRNA表達(dá)；Western Blot測(cè)定海馬神經(jīng)元總CaMKI

3、I和pCaMKII含量。
　　 結(jié)果:①慢性應(yīng)激導(dǎo)致大鼠在水迷宮和開野箱中的行為學(xué)異常,具體表現(xiàn)為應(yīng)激大鼠在訓(xùn)練6h和24h后,在水迷宮中的平均潛伏時(shí)間顯著性增加,抑制大鼠在開野箱中的活動(dòng)性和學(xué)習(xí)性。慢性應(yīng)激使大鼠腎上腺皮質(zhì)厚度顯著性增加。姜黃素和原花青素均能劑量依賴性地逆轉(zhuǎn)此種結(jié)果。與原花青素相比,姜黃素具有更好的療效。
　　 ②體內(nèi)實(shí)驗(yàn)顯示,姜黃素能夠使慢性應(yīng)激導(dǎo)致的海馬DG區(qū)Cu/Zn SOD低表達(dá)得到改善,并減少

4、體外細(xì)胞中ROS氧化產(chǎn)物；與慢性應(yīng)激組相比,姜黃素還能顯著性增加海馬CA3區(qū)神經(jīng)元樹突長度和分支點(diǎn)數(shù)目。
　　 ③體外實(shí)驗(yàn)顯示,與正常組相比,0.1mM皮質(zhì)酮處理使海馬神經(jīng)元內(nèi)NMDA2A mRNA表達(dá)水平顯著性增加,并激活CaMKII,顯著性增加pCaMKII水平。而姜黃素和丙咪嗪給藥后,海馬神經(jīng)元內(nèi)NMDA2A mRNA表達(dá)和pCaMKII水平均降低。
　　 結(jié)論:①姜黃素和原花青素都能劑量依賴性地逆轉(zhuǎn)應(yīng)激大鼠在水迷

5、宮和開野實(shí)驗(yàn)中的行為異常,對(duì)應(yīng)激造成的記憶行為損傷具有初步的改善作用。這種作用可能與它們保護(hù)應(yīng)激大鼠腎上腺皮質(zhì)形態(tài)和功能有關(guān)。并且,與原花青素相比,姜黃素具有更好的療效。
　　 ②姜黃素可以通過氧化應(yīng)激的預(yù)防調(diào)節(jié),對(duì)應(yīng)激損傷起到神經(jīng)保護(hù)作用。其可能與姜黃素增加Cu/Zn SOD活性并減少ROS產(chǎn)物有關(guān)。在體內(nèi),姜黃素還可以改善海馬CA3區(qū)錐體細(xì)胞層的樹突結(jié)構(gòu)和功能,并減少神經(jīng)元的損傷,共同增強(qiáng)海馬神經(jīng)元的突觸可塑性,保護(hù)神經(jīng)活性