環(huán)境因素對(duì)缺氧缺血性腦損傷新生鼠學(xué)習(xí)記憶及神經(jīng)可塑性的影響.pdf

1、背景與目的：缺氧缺血性腦損傷(hypoxic-ischemicbraindamage，HIBD)嚴(yán)重威脅新生兒生命并易造成兒童永久傷殘，至今缺乏理想有效的防治辦法。對(duì)成年腦損傷動(dòng)物模型的研究已證實(shí)，豐富環(huán)境能增強(qiáng)神經(jīng)可塑性，改善腦功能，促進(jìn)腦損傷修復(fù)，貧瘠環(huán)境的作用則與之相反。而不同環(huán)境因素對(duì)發(fā)育期腦損傷的作用及機(jī)制目前尚不清楚。為此，本實(shí)驗(yàn)擬觀察不同環(huán)境因素對(duì)HIBD新生鼠學(xué)習(xí)記憶及神經(jīng)可塑性的影響，探討可能的神經(jīng)機(jī)制，旨在為臨床應(yīng)用

2、豐富環(huán)境治療新生兒HIBD提供基礎(chǔ)理論支持和指導(dǎo)。 方法：采用Rice法建立7日齡(postnatalday7，P7)Sprague-Dawley(SD)新生大鼠HIBD模型，隨機(jī)分為三組：豐富環(huán)境(enrichedenvironment，EE)組、貧瘠環(huán)境(impoverishedenvironment，IE)組和標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境(standardenvironment，SE)組，另設(shè)假手術(shù)(Sham-operation，Sham)組

3、。于建模后第2d分別進(jìn)行不同環(huán)境干預(yù)，干預(yù)28d后，應(yīng)用Morris水迷宮測(cè)試大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，測(cè)量體重和腦重，HE染色觀察左側(cè)海馬病理形態(tài)學(xué)改變，尼氏染色計(jì)數(shù)左側(cè)海馬存活神經(jīng)元數(shù)目，免疫組織化學(xué)法檢測(cè)左側(cè)海馬生長(zhǎng)相關(guān)蛋白(growth-associatedprotein-43，GAP-43)灰度值和巢蛋白(nestin)陽性細(xì)胞數(shù)，RT-PCR法檢測(cè)左側(cè)海馬GAP-43mRNA和nestinmRNA光密度比值。 結(jié)果：

4、 1.在Morris水迷宮的定位航行和空間探索實(shí)驗(yàn)中，EE組成績(jī)明顯優(yōu)于SE組和IE組(P＜0.001)，與Sham組差異不明顯(P＞0.05)，而SE組則優(yōu)于IE組(P＜0.01)。2.在體重上，EE組明顯高于SE組(P＜0.05)和IE組(P＜0.01)，與Sham組差異不明顯(P＞0.05)，而SE組則高于IE組(P＜0.05)。在腦重上，EE組高于SE組(P＜0.01)和IE組(P＜0.001)，但低于Sham組(P＜0.05)

5、，SE組高于IE組，低于Sham組，差異顯著(P＜0.01)。 3.HE染色見Sham組左側(cè)海馬無異常，EE組左側(cè)海馬輕度異常，如神經(jīng)元排列稍紊亂、少量細(xì)胞丟失等，SE組和IE組左側(cè)海馬明顯異常，細(xì)胞層數(shù)減少，神經(jīng)元排列散亂、稀疏，細(xì)胞間隙增大，脫失明顯，核仁不清，可見核固縮、核碎裂。 4.神經(jīng)元尼氏染色計(jì)數(shù)顯示，EE組左側(cè)海馬神經(jīng)元存活數(shù)目多于SE組(P＜0.05)和IE組(P＜0.01)，與Sham組差異不明顯(P＞

6、0.05)，SE組低于Sham組(P＜0.01)，多于IE組(P＜0.05)。 5.免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示，EE組左側(cè)海馬GAP-43和nestin表達(dá)強(qiáng)于SE組和IE組(P＜0.05)，SE組又強(qiáng)于IE組和Sham組(P＜0.05)。 6.RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示，EE組左側(cè)海馬GAP-43mRNA表達(dá)強(qiáng)于SE組和IE組(P＜0.01)，SE組又強(qiáng)于IE組和Sham組(P＜0.05)。nestinmRNA表達(dá)EE組強(qiáng)

7、于SE組(P＜0.05)和IE組(P＜0.01)，SE組又強(qiáng)于IE組和Sham組(P＜0.01)。 結(jié)論： 1.與SE組HIBD鼠相比，EE組HIBD鼠體重和腦重的增長(zhǎng)明顯，海馬病理損害減輕，學(xué)習(xí)記憶能力增強(qiáng)，提示EE有利于腦損傷修復(fù)； 2.與SE組HIBD鼠相比，IE組HIBD鼠體重和腦重的增長(zhǎng)緩慢，海馬病理損害重，學(xué)習(xí)記憶能力明顯下降，提示IE不利于腦損傷修復(fù)； 3.與SE組HIBD鼠相比，EE組病側(cè)