低氧后處理體外干預缺氧缺血性腦損傷新生鼠的作用.pdf

1、背景：
　　臨床背景:新生兒缺氧缺血性腦損傷(Hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)是指各種圍產(chǎn)期窒息引起的部分或完全缺氧、腦血流減少或暫停導致胎兒或新生兒腦損傷。目前臨床上主要治療方法是對癥支持治療,尚缺乏有效療法。
　　科研背景:相對于低氧預處理(Hypoxic preconditioning,HPreC)而言,低氧后處理(Hypoxic postconditioning,HPostC)是

2、指在機體損傷后給予適度的低氧干預,誘導組織代償性修復。其主要作用機制是誘導低氧誘導因子1a(Hypoxia-inducible factor 1alpha,HIF-1a)的表達和促進神經(jīng)干細胞增殖及抑制氧自由基的生成等。HPostC可部分替代一些實驗顯示有效治療新生兒HIBD的方法。
　　國內(nèi)外最新研究:2003年趙志青等首次研究HPostC體內(nèi)干預心肌細胞的作用,實驗顯示HPostC能修復損傷的心肌細胞,但因體內(nèi)干預是有創(chuàng)性操作

3、而較難應用于臨床。2008年Pignataro等研究HPostC體外干預腦損傷成年鼠的作用,實驗顯示HPostC能修復成年鼠腦損傷,目前少有報道HPostC體外干預HIBD新生鼠的作用。
　　根據(jù)干預時間及周期不同,實驗分二部分研究HPostC體外干預HIBD新生鼠的作用。
　　第一部分實驗:單次低氧后處理體外干預HIBD新生鼠的作用
　　目的：
　　研究單次低氧后處理(Einmal hypoxic postco

4、nditioning; EHPC)體外干預HIBD新生鼠時HIF-1a表達和HIBD幼鼠學習記憶能力及情緒反應。
　　方法：
　　將204只7日齡SD新生鼠隨機分成四組(每組51只),假手術組、HIBD組、15％02+85%N2組及8%02+92%N2組。各組造模后放置缺氧艙中,分別充入21%02、21%02、15%02、8%02氧氮混合氣體1L/min,干預5min,頻率1次/天,周期1天。每組再隨機分2個亞組行免疫組化檢

5、測(n=6,海馬齒狀回HIF-1a表達)和神經(jīng)行為檢測(n=45,跳臺試驗、曠場試驗及高架十字迷宮試驗各15只)。
　　結(jié)果：
　　1.8%02+92%N2組HIF-1a表達量最高且與其它三組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),假手術組HIF-1a表達量最低(P<0.05),而HIBD組與15%02+85%N2組之間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　2.跳臺試驗示假手術組于學習潛伏期、記憶潛伏期、學習錯誤次數(shù)及記憶

6、錯誤次數(shù)中的均數(shù)最小且與其它三組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),其它三組之間差異無統(tǒng)計意義(P>0.05)。
　　3.曠場試驗示假手術組于周圍區(qū)距離、中央?yún)^(qū)距離、總距離和進入中央?yún)^(qū)次數(shù)中均數(shù)最小且與其它三組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),其它三組之間差異無統(tǒng)計意義(P>0.05)。
　　4.高架十字迷宮試驗示假手術組于閉臂距離、開放臂距離、總距離和進入開放臂次數(shù)的均數(shù)最小且與與其它三組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),其

7、它三組差異無統(tǒng)計意義(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　EHPC體外干預能促進HIBD新生鼠海馬齒狀回HIF-1a表達,但不能提高HIBD幼鼠學習記憶能力,也不能改善HIBD幼鼠情緒反應。
　　第二部分實驗:間歇性低氧后處理體外干預HIBD新生鼠的作用
　　目的：
　　研究間歇性低氧后處理(Intermittent hypoxic postconditioning,IHPC)體外干預HIBD新生鼠時HIF-

8、1a表達和HIBD幼鼠學習記憶能力及情緒反應。
　　方法：
　　動物模型制備、實驗分組、樣本量、檢測指標及檢驗方法與第一部分實驗相同,但各組干預時間為多日時程遞增方式,即第一天低氧干預5min,隨后每天遞增3min,頻率1次/天,周期7天。
　　結(jié)果：
　　1.HIF-1a:在四組之間兩兩比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),8%02+92%N2組HIF-1a均數(shù)最大,15%02+85%N2組均數(shù)高于HIBD

9、組,假手術組均數(shù)最低。
　　2.跳臺試驗:學習潛伏期和記憶潛伏期在四組中兩兩比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),8%02+92%N2組均數(shù)小于15%02+85%N2組。學習錯誤次數(shù)和記憶錯誤次數(shù)在8%02+92%N2組與15%02+85%N2組之間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),而在假手術組與HIBD組之間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),假手術組的均數(shù)小于HIBD組。
　　3.曠場試驗:曠場試驗各檢測項目在四組中兩兩

10、比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。HIBD組各檢測項目中均數(shù)最高,15%02+85%N2組各檢測項目均數(shù)高于8%02+92%N2組,假手術組各項目均數(shù)最低。
　　4.高架十字迷宮試驗:封閉臂距離、開放臂距離及總距離在四組之間兩兩比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),HIBD組各均數(shù)最大,15%02+85%N2組各均數(shù)大于8%02+92%N2組,假手術組各均數(shù)最小。開放臂次數(shù)在HIBD組、15%02+85%N2組及8%02