Simvastatin促進(jìn)缺氧缺血性腦損傷新生大鼠髓鞘形成的研究.pdf

1、目的：新生兒缺氧缺血性腦損傷(hypoxic-ischemic braindamage，HIBD)是圍產(chǎn)期最嚴(yán)重的神經(jīng)疾患，常引起新生兒死亡或神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育障礙，導(dǎo)致終生神經(jīng)功能缺陷，包括精神運(yùn)動(dòng)發(fā)育遲緩、癲癇、腦性癱瘓和認(rèn)知缺陷等。探尋安全有效的治療途徑一直是國(guó)際圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)研究熱點(diǎn)之一。傳統(tǒng)觀念認(rèn)為，中樞神經(jīng)系統(tǒng)(tentral nervous system，CNS)中灰質(zhì)比白質(zhì)更容易受缺氧缺血性損害攻擊，但近年來的研究發(fā)現(xiàn)，白質(zhì)是缺氧

2、缺血性損害攻擊的最重要靶點(diǎn)。寡突膠質(zhì)細(xì)胞(oligodendrocyte，OLs)是腦白質(zhì)的主要組成部分，是CNS的髓鞘形成細(xì)胞。近年來的流行病學(xué)和實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)育期OLs受興奮毒性損害和免疫/炎癥反應(yīng)(包括小膠質(zhì)細(xì)胞的活化和細(xì)胞因子的作用)的雙重攻擊后導(dǎo)致髓鞘形成障礙，而且不成熟的OLs對(duì)細(xì)胞因子損傷最敏感。髓鞘形成障礙將影響神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo)，引發(fā)運(yùn)動(dòng)功能障礙(腦性癱瘓)、遠(yuǎn)期認(rèn)知功能損害(智力障礙)、癲癇和兒童后期復(fù)雜的行為學(xué)問題等

3、。 Statins，即3-羥-3．甲基戊二酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑，是一種臨床上廣泛應(yīng)用的降膽固醇藥物。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，Statins還可以通過其多效性機(jī)制，即通過阻斷甲羥戊酸依賴的生物化學(xué)途徑，抑制蛋白質(zhì)的異戊二烯化，從而調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞功能、調(diào)節(jié)免疫炎癥反應(yīng)、促進(jìn)平滑肌細(xì)胞活化、增殖和遷移等，產(chǎn)生神經(jīng)保護(hù)和促進(jìn)神經(jīng)發(fā)生的作用，此作用日益受到重視。我們的前期工作也證實(shí)：Simvastatin應(yīng)用于大鼠坐骨神經(jīng)鉗夾損

4、傷，可能通過其多效性效應(yīng)，抑制炎癥反應(yīng)，促進(jìn)損傷神經(jīng)再生。但至今未見對(duì)發(fā)育期缺氧缺血腦損傷后髓鞘形成方面影響的研究報(bào)道。 由此我們選擇能通過血腦屏障影響CNS的Simvastatin，利用新生大鼠缺氧缺血腦損傷模型，觀察Simvastatin對(duì)發(fā)育期缺氧缺血腦損傷髓鞘形成的影響，并探討損傷過程中和藥物干預(yù)后小膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)性的變化，以期闡明Simvastatin對(duì)發(fā)育期缺氧缺血性腦損傷是否具有保護(hù)作用以及其可能的作用機(jī)制。

5、 實(shí)驗(yàn)材料和方法：選用7日齡SD大鼠，隨機(jī)分為正常對(duì)照組(Naive，n=10)、假手術(shù)組(Sham-operated，n=10)、模型組(Hypoxia-ischemia，HI，n=10)、 Simvastatin干預(yù)組(Hypoxia-ischemia+Simvastatin，HI+Sim，n=10)?；罨腟imvastatin給予預(yù)處理方式用藥，分別于生后的1d至7d每天同一時(shí)刻，20mg/kg皮下注射，每日1次。建立新生鼠缺氧

6、缺血性腦損傷模型后，分別于術(shù)后3d和7d計(jì)算體重增長(zhǎng)率，并對(duì)腦組織切片分別行尼氏染色觀察神經(jīng)元變化，免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)OX-42陽(yáng)性小膠質(zhì)細(xì)胞和MBP陽(yáng)性寡突膠質(zhì)細(xì)胞的免疫反應(yīng)性，并比較各組之間的差別。 結(jié)果：術(shù)后7d，Simvastatin干預(yù)組較模型組動(dòng)物體重增長(zhǎng)快(p<0.05)；術(shù)后3d和7d Nissl染色顯示，Simvastatin干預(yù)組和模型組相比神經(jīng)元損傷數(shù)量減少(p<0.05)；OX-42陽(yáng)性的小膠質(zhì)細(xì)胞免疫

7、組織化學(xué)顯示：模型組皮質(zhì)和海馬區(qū)的OX-42陽(yáng)性小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量較正常對(duì)照和假手術(shù)組顯著增加(p<0.01)，染色加深；而Simvastatin干預(yù)組的小膠質(zhì)細(xì)胞與模型組相比數(shù)量減少，3d減少更明顯，染色變淺。MBP陽(yáng)性的寡突膠質(zhì)細(xì)胞免疫組織化學(xué)顯示：模型組內(nèi)囊和外囊等部位的OLs的MBP的密度值較正常對(duì)照和假手術(shù)組降低(p<0.01)，3d和7d無(wú)差別，而Simvastatin干預(yù)組MBP的密度值和模型組相比顯著增加(p<0.05)。

8、 結(jié)論：1．新生大鼠缺氧缺血性腦損傷后體重增長(zhǎng)緩慢，腦外觀可見損傷側(cè)腦水腫、壞死、萎縮，Nissl染色可見患側(cè)損傷側(cè)皮層、海馬以及部分丘腦核團(tuán)神經(jīng)元脫失、壞死。2．缺氧缺血性腦損傷后損傷側(cè)皮質(zhì)、海馬和紋狀體等部位可見程度不同的活化的OX-42陽(yáng)性小膠質(zhì)細(xì)胞浸潤(rùn)，表現(xiàn)為數(shù)量增加和形態(tài)改變。3．缺氧缺血性腦損傷后損傷側(cè)白質(zhì)如內(nèi)囊和外囊的OLs的MBP的密度值顯著降低。4．Simvastatin預(yù)處理干預(yù)可以減輕由缺氧缺血性腦損傷引起的