細(xì)胞紅蛋白在新生大鼠缺氧缺血性腦損傷時(shí)表達(dá)的研究.pdf

1、新生兒缺氧缺血性腦病(HIE)圍產(chǎn)期嚴(yán)重的窒息缺氧造成,HIE患兒多留有不同程度的后遺癥.近年來(lái),因窒息缺氧導(dǎo)致的缺氧腦損傷日益受到重視.2002年新發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞紅蛋白(CYGB)是繼脊椎動(dòng)物血紅蛋白、肌紅蛋白和腦紅蛋白之后所發(fā)現(xiàn)的第四類攜氧球蛋白,具有可逆性結(jié)合,運(yùn)輸及儲(chǔ)存氧的主要生物學(xué)功能,推測(cè)可能在缺氧缺血性損傷時(shí)表達(dá)增強(qiáng),并且可能發(fā)揮缺氧誘導(dǎo)的神經(jīng)保護(hù)作用.細(xì)胞紅蛋白的發(fā)現(xiàn)為缺氧缺血性腦損傷(HIBD)的發(fā)病機(jī)制及防治方案提供了新

2、的切入點(diǎn).目前有關(guān)CYGB的缺氧缺血后表達(dá)試驗(yàn)并不多,并且主要集中在體外實(shí)驗(yàn),活體內(nèi)缺氧缺血性腦損傷(HIBD)時(shí)CYGB的表達(dá)變化尚缺乏詳細(xì)資料,我們采用免疫組織化學(xué)法、免疫印跡法,從蛋白水平系統(tǒng)研究了新生7天齡大鼠腦缺氧缺血急性期CYGB在不同時(shí)間點(diǎn)表達(dá)的變化情況,初步探討CYGB在腦缺氧缺血早期的表達(dá)規(guī)律,旨在為腦缺血缺氧相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)理及臨床治療提供理論支持.
　　目的：探討細(xì)胞紅蛋白在7天齡新生大鼠缺氧缺血急性期腦內(nèi)的

3、表達(dá)特點(diǎn)與規(guī)律.
　　方法：將7日齡新生Wistar大鼠138只,隨機(jī)分為缺氧后0,4,12,24,48小時(shí)組以及假手術(shù)對(duì)照組(常氧組),共6組.其中實(shí)驗(yàn)組在手術(shù)后制成缺氧缺血腦損傷模型,并且在血流阻斷0,4,12,24,48小時(shí)取腦;對(duì)照組為假手術(shù)組.采用免疫組化染色法和免疫印跡法從蛋白水平分析CYGB的分布及表達(dá)特點(diǎn).
　　結(jié)果：免疫組織化學(xué)染色顯示細(xì)胞紅蛋白主要表達(dá)于皮質(zhì),丘腦,海馬神經(jīng)元的胞漿,各缺氧組細(xì)胞紅蛋白表達(dá)

4、數(shù)量強(qiáng)度均高于常氧組(對(duì)照組),且隨時(shí)間遞增,其中缺氧24、48小時(shí)組表達(dá)最強(qiáng).免疫印跡灰度分析結(jié)果顯示,各缺氧組細(xì)胞紅蛋白表達(dá)量高于常氧組,其差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.000),其中缺氧12小時(shí)組細(xì)胞紅蛋白表達(dá)明顯高于0、4小時(shí)組(P<0.000),缺氧24、48小時(shí)組的表達(dá)明顯高于缺氧12小時(shí)組.缺氧0、4小時(shí)組間無(wú)差別(P>0.05),缺氧24、48小時(shí)組間亦無(wú)差別(P>0.05).
　　結(jié)論：7天齡新生大鼠缺氧缺血性腦