轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β-,1-在新生大鼠缺氧缺血性腦損傷后的表達(dá)研究.pdf

1、目的：利用新生大鼠缺氧缺血性腦損傷(hypoxic-ischemic brain damage HIBD)動(dòng)物模型，觀察HIBD后不同時(shí)間點(diǎn)腦細(xì)胞形態(tài)的變化，以及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)的表達(dá)變化，從而探討TGF-β1與HIBD之間可能存在的關(guān)系，為兒科臨床新生兒缺氧缺血性腦病的相關(guān)預(yù)防和治療提供實(shí)驗(yàn)和理論的依據(jù)。 方法：7日齡Wistar大鼠48只，雌雄不限，體重12-18g，隨機(jī)分為2組：對(duì)照組(8只)，實(shí)行假手術(shù)，

2、只游離右側(cè)頸總動(dòng)脈不結(jié)扎，不作缺氧處理；HIBD模型組(40只，采用Rice法制備HIBD模型)，根據(jù)處死動(dòng)物的時(shí)間不同，又隨機(jī)分為HIBD后12h組，24 h組，72 h組，5d組，7 d組，共5個(gè)亞組，每組8只。各組在其相應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)斷頭處死并取腦組織，用于常規(guī)病理分析及免疫組化染色檢測(cè)大腦皮層TGF-β1表達(dá)。采用BI-2000醫(yī)學(xué)圖象分析系統(tǒng)進(jìn)行圖象采集與分析，在相同的光亮強(qiáng)度和放大倍數(shù)(10×40)條件下統(tǒng)計(jì)陽(yáng)性細(xì)胞平均灰度值，

3、數(shù)據(jù)以-x±s表示。用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。 結(jié)果：①實(shí)驗(yàn)前各組新生大鼠行為能力正常，模型制做過(guò)程中全部發(fā)生了不同程度的異常改變。對(duì)照組未出現(xiàn)上述行為異常。②HE染色：光鏡下，對(duì)照組腦組織各部位的結(jié)構(gòu)及細(xì)胞層次清楚、形態(tài)正常，無(wú)神經(jīng)細(xì)胞缺失；HIBD組術(shù)后12小時(shí)可見(jiàn)神經(jīng)元胞體腫脹，72小時(shí)腫脹明顯，細(xì)胞排列紊亂，5-7天細(xì)胞壞死明顯，神經(jīng)元數(shù)量明顯減少，正常排列結(jié)構(gòu)消失，有空泡形成。③免疫組化染色：對(duì)照組，未出現(xiàn)明

4、顯的TGF-β1免疫組化陽(yáng)性細(xì)胞；HIBD模型組，TGF-β1的表達(dá)先上升后下降，高峰在72h組。HIBD模型組各時(shí)間點(diǎn)分別與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；HIBD模型組各時(shí)間點(diǎn)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 結(jié)論：大量文獻(xiàn)已證實(shí)，TGF-β1是一種具有多功能的細(xì)胞因子，可以通過(guò)多種途徑減輕HIBD，從而發(fā)揮對(duì)腦組織的保護(hù)及修復(fù)作用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示HIBD后，所測(cè)目標(biāo)TGF-β1的表達(dá)隨著病變的進(jìn)展有明顯上