胰島素樣生長(zhǎng)因子-1對(duì)缺氧缺血性腦損傷新生小鼠腦細(xì)胞線粒體膜電位的影響.pdf

1、目的:探討胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)對(duì)缺氧缺血性腦損傷(HIBD)急性期新生小鼠腦細(xì)胞線粒體膜電位DYm的影響。
　　方法:采用改良Rice方法,將右側(cè)頸總動(dòng)脈永久性結(jié)扎后再置8％O2缺氧艙中持續(xù)缺氧2h制備新生小鼠右腦HIBD動(dòng)物模型。7日齡C57/BL新生小鼠91只隨機(jī)分為正常對(duì)照組(n=7)、假手術(shù)組(n=22)、缺氧缺血(HI)組(n=22)、假手術(shù)+IGF-1組(n=18)、HI+IGF-1組(n=22)。正常對(duì)

2、照組不做任何處理,假手術(shù)組僅分離右側(cè)頸總動(dòng)脈,但不結(jié)扎;假手術(shù)+IGF-1組、HI+IGF-1組在手術(shù)后即刻給予腹腔注射IGF-1(50ug/kg),假手術(shù)組、HI組注射等體積生理鹽水,觀察小鼠早期神經(jīng)行為變化,取五組小鼠各時(shí)點(diǎn)腦組織HE染色、Nissl染色觀察病理形態(tài)學(xué)改變,術(shù)后48h采用干濕法分別測(cè)定假手術(shù)組、模型組、HI+IGF-1組腦含水量;各組小鼠于術(shù)后0、3、6、12、24、48h取大腦皮質(zhì)、海馬、丘腦,制成單細(xì)胞懸液后以羅

3、丹明123(Rhodamin123,Rho123)染色標(biāo)記,并利用流式細(xì)胞儀分別測(cè)定各部位腦細(xì)胞線粒體膜電位DYm的變化。
　　結(jié)果:
　　(1)HI后48h右側(cè)腦含水量顯著高于假手術(shù)組左、右腦(P<0.01);HI+IGF-1組右側(cè)腦含水量明顯低于HI組(P<0.01)。
　　(2)HI+IGF-1組新生小鼠24h后神經(jīng)行為異常發(fā)生率明顯低于HI組(P<0.01)。
　　(3)HE染色、Nissl染色顯示正常對(duì)

4、照組、假手術(shù)組、假手術(shù)+IGF-1組雙側(cè)腦組織和HI組左側(cè)腦組織結(jié)構(gòu)無(wú)病理改變,HI組右側(cè)腦組織出現(xiàn)水腫、變性、凋亡和壞死,大腦皮質(zhì)、海馬、丘腦分別在術(shù)后3、6、12h出現(xiàn)腫脹、凋亡。HI后48h神經(jīng)元腫脹、變性最為明顯,具有凋亡特征的神經(jīng)細(xì)胞達(dá)高峰。HI+IGF-1組右側(cè)腦組織水腫、變性、凋亡和壞死均較HI組減輕,具有凋亡特征的神經(jīng)細(xì)胞明顯減少。
　　(4)正常對(duì)照組、假手術(shù)組、假手術(shù)+IGF-1組新生小鼠大腦皮質(zhì)、海馬、丘腦各

5、部位在不同時(shí)間點(diǎn)平均熒光強(qiáng)度無(wú)明顯差異(P>0.05)。HI組新生小鼠腦細(xì)胞線粒體膜電位DYm的降低最先出現(xiàn)在大腦皮質(zhì)(術(shù)后3h),其次為海馬(術(shù)后6h),最后在丘腦(術(shù)后12h);HI+IGF-1組各部位腦細(xì)胞線粒體膜電位DYm高于HI組(P<0.01)。
　　結(jié)論:應(yīng)用IGF-1干預(yù)治療可明顯減輕缺氧缺血造成的腦水腫,降低HIBD后早期神經(jīng)行為異常發(fā)生率,減少神經(jīng)細(xì)胞凋亡,HIBD新生小鼠腦細(xì)胞線粒體膜電位DYm的降低最先出現(xiàn)