慢性不可預(yù)見性應(yīng)激狀態(tài)下海馬、前額皮質(zhì)galanin表達(dá)變化及其神經(jīng)投射.pdf

1、研究目的與意義:
　　抑郁癥是一種常見的精神障礙,具有高患病率、高自殺率、低治愈率、易自殘等特點(diǎn),其核心癥狀包括快感缺乏、抑郁心境、自責(zé)自罪感和行為絕望,常伴有認(rèn)知功能受損、疲乏、食欲下降、體重減輕、睡眠節(jié)律紊亂等。此外,抑郁癥常與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病和Ⅱ型糖尿病相伴行,并與一些慢性疾病的預(yù)后相關(guān)。據(jù)世界衛(wèi)生組織預(yù)測(cè),到2020年抑郁癥將成為僅次于缺血性心臟病的第二大疾病。
　　目前認(rèn)為,遺傳和環(huán)境因素是導(dǎo)致抑郁癥形成的

2、主要原因,其中環(huán)境因素起著“扳機(jī)點(diǎn)”的作用。應(yīng)激性事件具有慢性、低強(qiáng)度、長(zhǎng)期存在等特點(diǎn),是抑郁癥最常見的誘發(fā)因素。海馬是應(yīng)激易損的器官,同時(shí)也是HPA軸的高位調(diào)節(jié)中樞。前額皮質(zhì)是認(rèn)知和情感整合的高級(jí)中樞,二者均參與抑郁癥的發(fā)生發(fā)展過程。Gal是一種含有29/30個(gè)氨基酸的神經(jīng)肽,廣泛分布于中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng),通過三種G蛋白偶聯(lián)受體(GalR1、GalR2、GalR3)發(fā)揮多種生物學(xué)效應(yīng)。在中樞神經(jīng)系統(tǒng),Gal可與NA、5-HT共表達(dá),并

3、調(diào)節(jié)NA、5-HT的合成和釋放。眾所周知,NA和5-HT是參與抑郁癥發(fā)病的重要神經(jīng)遞質(zhì),因此,Gal可能參與了抑郁癥的發(fā)生發(fā)展過程。中縫背核(DRN)是腦干5-HT能神經(jīng)元的主要分布區(qū),可發(fā)出纖維至海馬和前額皮質(zhì)。目前抑郁狀態(tài)下Gal在上述部位的表達(dá)情況尚不明了,DRN內(nèi)Gal神經(jīng)元是否與額葉、顳葉海馬部位有纖維投射都不得而知,而這些也是研究Gal是否參與抑郁癥發(fā)病的關(guān)鍵因素之一。為此本研究首先建立國(guó)際公認(rèn)的CUMS抑郁模型,運(yùn)用RT-

4、PCR和免疫組織化學(xué)技術(shù)相結(jié)合的方法,觀察抑郁狀態(tài)下大鼠海馬、前額皮質(zhì)內(nèi)Gal及GalmRNA的表達(dá)情況,隨后利用逆行追蹤結(jié)合免疫組織化學(xué)技術(shù),觀察是否存在DRN-海馬、DRN-前額皮質(zhì)Gal能神經(jīng)通路;為進(jìn)一步探討Gal在抑郁癥發(fā)病過程中的作用及其神經(jīng)通路提供形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。
　　研究方法:
　　1.建立國(guó)際公認(rèn)的慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激抑郁模型,利用曠場(chǎng)試驗(yàn)和糖水偏好試驗(yàn)檢測(cè)抑郁模型的可靠性,隨后利用RT-PCR結(jié)合Gal免疫

5、組織化學(xué)技術(shù)監(jiān)測(cè)慢性不可預(yù)見性應(yīng)激狀態(tài)下Gal及GalmRNA在海馬、前額皮層的表達(dá)變化情況;
　　2.參照Paxis-Waston大鼠腦立體定位圖譜,分別確定DRN、前額皮質(zhì)和海馬腦區(qū)的坐標(biāo),將逆行追蹤劑FG注入各坐標(biāo)點(diǎn)后,利用Gal免疫組織化學(xué)方法分別觀察FG/Gal雙標(biāo)神經(jīng)元在DRN、海馬和前額皮質(zhì)間表達(dá)情況。
　　研究結(jié)果:
　　1.將FG注入中縫背核喙側(cè)區(qū),可見Gal/FG雙標(biāo)神經(jīng)元主要分布于注射點(diǎn)同側(cè)的前額

6、皮質(zhì)腹內(nèi)側(cè)區(qū),尤其是PL和IL區(qū)。
　　2.將FG注入中縫背核中間區(qū),可見Gal/FG雙標(biāo)神經(jīng)元均等的分布于注射點(diǎn)同側(cè)的前額皮質(zhì)各區(qū),且在腹側(cè)海馬齒狀回可見雙標(biāo)神經(jīng)元的分布。
　　3.將FG注入中縫背核尾側(cè)區(qū),可見Gal/FG雙標(biāo)神經(jīng)元均等的分布于注射點(diǎn)同側(cè)的前額皮質(zhì),且在背側(cè)海馬齒狀回可見雙標(biāo)神經(jīng)元的分布。
　　4.將FG注入腹側(cè)前額皮層,可見Gal/FG雙標(biāo)神經(jīng)元主要分布于中縫背核腹側(cè),尤其集中在內(nèi)側(cè)縱束周圍。

7、r>　　5.將FG注入背側(cè)前額皮層,可見Gal/FG雙標(biāo)神經(jīng)元主要分布于中縫背核腹側(cè)。
　　6.將FG注入背側(cè)海馬齒狀回,可見Gal/FG雙標(biāo)神經(jīng)元主要集中于中縫背核背側(cè)近中腦導(dǎo)水管灰質(zhì)周圍。
　　7.將FG注入腹側(cè)海馬齒狀回,可見Gal/FG雙標(biāo)神經(jīng)元彌散分布于中縫背核各區(qū)。
　　8.CUMS狀態(tài)下,海馬腦區(qū)Gal及GalmRNA的表達(dá)量減少,而前額皮質(zhì)內(nèi)Gal及GalmRNA的表達(dá)量未見明顯改變。
　　研究結(jié)