氧化應(yīng)激狀態(tài)下大鼠海馬N-Shc蛋白功能改變的探討.pdf

1、目的：研究大鼠N-Shc蛋白的表達(dá)，以及經(jīng)H2O2刺激后不同時(shí)間點(diǎn)大鼠海馬N-Shc蛋白的磷酸化水平改變，和不同濃度H2O2刺激后大鼠海馬N-Shc蛋白與PKCδ蛋白的磷酸化水平以及兩者結(jié)合的改變，探討氧化應(yīng)激對大鼠海馬N-Shc蛋白功能的影響。 方法：運(yùn)用免疫印跡技術(shù)，檢測：①Shc 家族蛋白在大鼠神經(jīng)系統(tǒng)及其它系統(tǒng)中的表達(dá)：②N．She和PKCδ蛋白在不同月齡大鼠全腦中的表達(dá)；③H2O2刺激后不同時(shí)間點(diǎn)大鼠海馬N-Shc蛋白

2、的磷酸化水平改變；④不同濃度H2O2刺激后大鼠海馬N-She蛋白與PKC8蛋白的磷酸化水平以及兩者結(jié)合的改變。所得數(shù)據(jù)以正常對照的單位密度值為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行校正，用SPSS forwindows 13.0軟件進(jìn)行單因素方差分析。 結(jié)果：大鼠N-She蛋白的表達(dá)集中在神經(jīng)系統(tǒng)，在心臟、肝臟和肌肉等組織中幾乎沒有表達(dá)；大腦N-She蛋白在孕12.5天和孕15.5天僅有少量表達(dá)，在出生后表達(dá)量明顯增多，而PKCδ蛋白在大鼠大腦的各個(gè)發(fā)育時(shí)期

3、都有表達(dá)；H2O2刺激后，大鼠海馬N-Shc蛋白的磷酸化水平在5min內(nèi)快速上升，并一直持續(xù)到30min；不同濃度H2O2刺激后，N-Shc蛋白和PKC6蛋白的磷酸化水平出現(xiàn)逐漸升高，H2O2濃度5mM組和對照組之間具有顯著性差異(P<0.01)；不同濃度H2O2刺激后，N-She蛋白和PKCδ蛋白的結(jié)合明顯增加，其結(jié)合量隨H2O2濃度的升高而增加，5mM H2O2刺激組和對照組之間具有顯著性差異(P<0.05)。 結(jié)論：大鼠海