消散因子石英晶體微天平和熒光猝滅動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)表沒食子兒茶素沒食子酸酯與人唾液的相互作用.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:采用QCM-D在體外原位、實(shí)時(shí)和動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)人全唾液(WS)、腮腺唾液(PS)和下頜下腺/舌下腺唾液(SMSLS)在HA芯片表面吸附和解離的過程。通過自組裝單層膜(SAM)的WS和PS,測(cè)量EGCG對(duì)WS和PS生物膜的吸附和解離的過程。采用熒光猝滅實(shí)驗(yàn),以考察EGCG猝滅WS和PS的效果。 方法:收集刺激性的上述三種唾液,監(jiān)測(cè)唾液蛋白吸附于HA芯片表面以及SAM的WS和PS吸附EGCG所造成的頻率改變(△F)和消散因子變化(△

2、D),及形成生物膜的質(zhì)量(m)、厚度(h)、剪切彈性模量(μ)和剪切粘度(η)。根據(jù)Langmuir(L)和Freundlich(F)吸附等溫線的相關(guān)系數(shù)判斷EGCG在WS和PS膜表面的吸附模型,計(jì)算吸附動(dòng)力學(xué)常數(shù):L常數(shù)(K)、飽和吸附量(Mm)、F常數(shù)(Kf)、F吸附強(qiáng)度常數(shù)(1/n)。采用EGCG作為WS和PS的熒光猝滅劑,考察EGCG猝滅WS和PS的效果和猝滅類型,計(jì)算表觀靜態(tài)猝滅常數(shù)(K)、靜態(tài)猝滅常數(shù)(Ks)、表觀靜態(tài)猝滅結(jié)

3、合常數(shù)(KA)、靜態(tài)猝滅結(jié)合常數(shù)(KLB)和結(jié)合位點(diǎn)數(shù)(n)。 結(jié)果:SMSLS的蛋白質(zhì)吸附量最大,形成的膜最厚,PS最小,WS介于兩者中間。SMSLS膜的硬度最小,膜的流動(dòng)性最大,剪切彈性模量和剪切粘度最小。WS膜的硬度介于PS和SMSLS之間。PS膜表面形成EGCG吸附層后,剪切彈性模量和剪切粘度變小。WS膜含水量大,吸附EGCG后部分水分被擠出,因此剪切彈性模量和剪切粘度增大。采用L和F吸附等溫式均可合理表征EGCG對(duì)WS

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