兩種海參共附生微生物及兩種中國(guó)南海無(wú)脊椎動(dòng)物的次生代謝產(chǎn)物研究.pdf

1、我國(guó)海洋生物資源豐富，海洋無(wú)脊椎動(dòng)物及其共附生微生物由于能夠產(chǎn)生豐富多樣的具有不同生物活性的次生代謝產(chǎn)物，已經(jīng)成為了海洋活性物質(zhì)研究的熱點(diǎn)。
　　 我們課題組多年來(lái)一直致力于多種海洋無(wú)脊椎動(dòng)物及海洋來(lái)源微生物的次生代謝產(chǎn)物研究。作為本課題組整體目標(biāo)的一部分，為尋找海洋活性次生代謝產(chǎn)物，本課題對(duì)一種仿刺參共附生放線菌（Brevibacterium sp.）、一種中國(guó)南海黑乳海參共附生白色側(cè)齒霉菌（Engyodontium albu

2、m）以及一種中國(guó)南海短指軟珊瑚（Sinularia sp.）和一種中國(guó)南海隋氏蒂殼海綿（Theonella swinhoei）的化學(xué)成分進(jìn)行了研究。應(yīng)用硅膠柱層析、Sephadex LH-20凝膠柱層析和HPLC等多種現(xiàn)代色譜分離技術(shù)，對(duì)上述4種樣品進(jìn)行了系統(tǒng)的分離純化，運(yùn)用NMR、2D-NMR、HRESIMS、CD等多種現(xiàn)代光譜技術(shù)以及結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道共鑒定了47個(gè)化合物，其中新化合物4個(gè)。各化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)為:環(huán)-（L-脯氨酸-L-苯丙

3、氨酸）、環(huán)-（L-脯氨酸-L-亮氨酸）、環(huán)-（L-脯氨酸-L-酪氨酸）、環(huán)-（L-脯氨酸-L-纈氨酸）、環(huán)-（L-纈氨酸-甘氨酸）、環(huán)-（L-丙氨酸-L-亮氨酸）、環(huán)-（L-亮氨酸-L-酪氨酸）、環(huán)-（L-脯氨酸-L-脯氨酸）、環(huán)-（L-丙氨酸-L-異亮氨酸）、環(huán)-（L-蘇氨酸-L-亮氨酸）、環(huán)-（L-脯氨酸-L-甲硫氨酸）、吲哚甲酸、吲哚乙酸、吲哚乙醇、吲哚乙酸甲酯、(22E，24R)-5α，8α-過(guò)氧化麥角甾-6，22-二烯-3β-

4、醇、(22E，24R)-麥角甾-5，7，22-三烯-3β-醇、(22E，24R)-麥角甾-7，22-二烯-3β，5α,6β-三醇、3β，5α-二羥基-(22E，24R)-麥角甾-7，22-二烯-6-酮、3β，5α-二羥基-6-甲氧基-麥角甾-7，22-二烯、Sinularin、 dihydrosinularin、 flexilarin B、5-dehydrosinularolide、 sinulaflexiolide A、3，4(∶)8

5、，11-二環(huán)氧-7-乙酰氧基西松烷-15(17)-烯-1，12-交酯、11-epi-sinulariolide acetate、sinulariolide、麥角甾-5，24(28)-二烯-3β,7α,11α,16β-四醇、麥角甾-5，24(28)-二烯-3β-醇、麥角甾-5，22，24(28)-三烯-3β-醇、膽甾醇、24R-甲基-5α,8α-氧化膽甾-8(14)-烯-3β-醇、24R-甲基-3β，5α-二羥基-5α-膽甾-4，8-二烯

6、-7-酮、Conicasterol、Conicasterol B、4α,24S-二甲基-5α-膽甾-8(14)-烯-3β-醇、Conicasterol K、(2Z,6R,8S)-3，6-氧-4，6，8-三乙基-2，4-十二二烯酸酯、(2Z,6R，8R，9E)-3，6-氧-4，6，8-三乙基-2，4，9-十二三烯酸酯、(2Z,6R，8R，9E)-2溴-3，6-氧-4，6，8-三乙基-2，4，9-十二三烯酸酯、鄰苯二甲酸二異丁酯、鄰苯二甲酸

7、二正庚酯、胸腺嘧啶脫氧核苷。
　　 本課題首次研究報(bào)道了仿刺參共附生微生物次生代謝產(chǎn)物的化學(xué)成分，得到的11個(gè)環(huán)二肽類化合物均為首次從放線菌Brevibacterium sp.中分離得到。本課題還首次研究報(bào)道了中國(guó)南海黑乳海參共附生白色側(cè)齒霉菌Engyodontium album次生代謝產(chǎn)物的化學(xué)成分，得到的5個(gè)甾體類化合物均為首次從白色側(cè)齒霉菌Engyodontium album中分離得到。
　　 本課題運(yùn)用多種現(xiàn)代色

8、譜分離技術(shù)，對(duì)兩種海參共附生微生物及一種軟珊瑚和一種海綿的次生代謝產(chǎn)物的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，得到了一系列化合物。并運(yùn)用波譜學(xué)與文獻(xiàn)比對(duì)相結(jié)合的方法對(duì)其中的47個(gè)化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)確定。其中化合物GE-9、LG-1、LG-2、LG-9為新的化合物?；衔颒S-1、HS-3、HS-4具有不同程度的抗鰻弧菌作用。化合物GJ-1是普遍存在于真菌中的常規(guī)代謝產(chǎn)物，具有多種抑菌活性，另外還對(duì)藤壺幼蟲(chóng)附著表現(xiàn)出強(qiáng)的抑制活性?；衔颎J-3和GJ-5對(duì)人

9、體嗜中性細(xì)胞彈性蛋白酶具有抑制活性，另外化合物GJ-3還有較好的鹵蟲(chóng)致死活性?；衔颎J-4對(duì)肺癌細(xì)胞A549具有細(xì)胞毒活性;GE-1和GE-9對(duì)骨肉瘤細(xì)胞MG-63具有細(xì)胞毒活性。本研究為海洋微生物來(lái)源及海洋無(wú)脊椎動(dòng)物來(lái)源的天然產(chǎn)物研究積累了新的資料，對(duì)我國(guó)豐富的海洋資源開(kāi)發(fā)具有重要的意義。
　　 本課題在尋找活性次生代謝產(chǎn)物的同時(shí)，還試圖研究海參共附生微生物與其宿主海參在代謝上的作用關(guān)系及海參共附生微生物在其宿主海參的化學(xué)防

10、御機(jī)制中所起的作用。從本研究所得結(jié)果可以看出仿刺參共附生放線菌Brevibacterium sp.和黑乳海參共附生白色側(cè)齒霉菌Engyodontium album各自的次生代謝產(chǎn)物與在其宿主中發(fā)現(xiàn)的皂苷類活性物質(zhì)在結(jié)構(gòu)上相差甚遠(yuǎn)，可以說(shuō)這兩種微生物可能并未直接參與其各自宿主的代謝。這兩種共附生微生物及其各自的代謝產(chǎn)物在海參化學(xué)防御機(jī)制中的作用還有待于進(jìn)一步研究。
　　 本課題在對(duì)Sinularia短指軟珊瑚次生代謝產(chǎn)物的研究中，

11、分離得到一個(gè)二聚西松烷四萜。迄今為止發(fā)現(xiàn)的大部分二聚西松烷四萜都是來(lái)源于Sarcrophyton屬肉芝軟珊瑚，只有很少幾個(gè)來(lái)源于Sinularia屬短指軟珊瑚，其中就包括本課題得到的化合物GE-8。本研究的結(jié)果對(duì)于進(jìn)一步研究Sinularia短指軟珊瑚中的二聚西松烷四萜有一定的指導(dǎo)意義。另外，獲得的四羥基甾醇GE-9經(jīng)體外抗腫瘤活性測(cè)試發(fā)現(xiàn)具有不錯(cuò)的抗骨肉瘤細(xì)胞(MG-63)活性，IC50值為9.8μg/mL，具有進(jìn)一步研究的潛力。

12、r>　　 對(duì)于隋氏蒂殼海綿（T.swinhoei）次生代謝產(chǎn)物的研究，我們發(fā)現(xiàn)了2個(gè)新的4-甲基甾體類化合物，豐富了天然化合物的種類和數(shù)量。本研究還首次從該屬海綿中得到一類烯酸酯類化合物，這類化合物具有細(xì)胞毒活性、抗瘧活性，而且是一類新的過(guò)氧化酶活性增殖子γ受體(PPARγ)的配體，具有潛在的藥物開(kāi)發(fā)價(jià)值。通過(guò)文獻(xiàn)檢索，我們發(fā)現(xiàn)這一類物質(zhì)在多種屬海綿甚至柳珊瑚中均有產(chǎn)生，于是我們猜想這類化合物可能是由與海綿及珊瑚都能共附生的微生物直接