轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)對(duì)Kruppel樣因子15(KLF15)的調(diào)控機(jī)制研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:探討TGF-β1對(duì)kruppel樣因子15(KLF15)表達(dá)的影響及其調(diào)控機(jī)制
　　 方法:培養(yǎng)大鼠間質(zhì)成纖維細(xì)胞(NRK-49F)，給予TGF-β1刺激及KLF15質(zhì)粒轉(zhuǎn)染NRK-49F過(guò)表達(dá)觀察KLF15和細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)變化，通過(guò)Real-time PCR檢測(cè)KLF15mRNA和FNmRNA、CTGFmRNA、COLⅢmRNA變化，并通過(guò)WesternBlot檢測(cè)KLF15和CTGF蛋白表達(dá)變化，通過(guò)ELSA檢測(cè)

2、細(xì)胞培養(yǎng)上清液FN蛋白和Ⅲ型膠原變化。絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路特異性斷劑預(yù)處理NRK-49F后給予TGF-β1干預(yù)，觀察FNmRNA、CTGFmRNA、COLⅢmRNA、KLF15mRNA和KLF15蛋白及相關(guān)蛋白的磷酸化水平變化。
　　 結(jié)果:TGF-β1干預(yù)大鼠腎臟成纖維細(xì)胞(NRK-49F)后促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的分泌，抑制KLF15的表達(dá)。NRK-49F過(guò)表達(dá)KLF15后細(xì)胞外基質(zhì)表達(dá)明顯降低，ERK/M

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