制何首烏多糖的分離純化及其體外抗衰老活性研究.pdf

1、目的：研究制何首烏精制多糖的初步結(jié)構(gòu)和粗多糖的體外抗衰老活性,為何首烏多糖的臨床應(yīng)用提供了廣闊的發(fā)展空間。
　　方法：(1)水提醇沉法得到制何首烏粗多糖RPMP,經(jīng)sevage法除蛋白、雙氧水脫色和DEAE-52及SephadexG-150柱層析純化分離,分別用水和不同濃度氯化鈉為洗脫溶液,苯酚硫酸法,在紫外490nm處檢測,收集各組分,冷凍干燥,得到制何首烏精制多糖RPMP-a、RPMP-b和RPMP-c。(2)制何首烏精制多糖

2、的初步結(jié)構(gòu)分析。將得到的制何首烏精制多糖RPMP-a、RPMP-b和RPMP-c經(jīng)高效凝膠滲透色譜法(HPGPC)測定純度和分子量,采用紅外光譜測定了多糖的初步結(jié)構(gòu)。(3)在細(xì)胞水平對制何首烏多糖進(jìn)行體外過氧化氫誘導(dǎo)損傷保護(hù)作用的初步研究。采用MTT法觀察PC12細(xì)胞和HepG2細(xì)胞形態(tài)和檢測細(xì)胞存活率,采用Hochest33258熒光染色法和流式細(xì)胞術(shù)測定細(xì)胞凋亡率。
　　結(jié)果：(1)RPMP-a經(jīng)HPGPC鑒定有雜質(zhì),純度鑒定