黃荊子抗腫瘤有效部位EVn50及有效成分VBE-1、VBE-2生物轉化、藥物動力學比較研究.pdf

1、黃荊子是傳統(tǒng)中藥黃荊（Vitex negundo L.）的果實，具有廣泛的藥用價值。前期實驗中對黃荊子抗腫瘤活性部位（EVn50）的研究證明，EVn50具有廣譜抗腫瘤活性，對多種腫瘤細胞有良好的抑制作用。VBE-1和VBE-2是從EVn50中分離得到的代表性芳基二氫萘木脂素類化合物，其化學名稱分別為6-羥基-4-（4-羥基-3-甲氧基苯基）-3-羥甲基-7-甲氧基-3，4-二氫（3R，4S）-2-醛基萘和6-羥基-4-（4-羥基-3-甲

2、氧基苯基）-3-羥甲基-5-甲氧基-3，4-二氫（3R，4S）-2-醛基萘。其中VBE-1是第一個來源于天然產物木脂素類的PI3K/Akt/mTOR通路的抑制劑，具有開發(fā)成抗腫瘤藥物的潛力。 課題組在體外對VBE-1進行了多種腫瘤細胞的抑制試驗，結果顯示VBE-1對卵巢癌細胞的生長抑制作用最強，IC50達到1.40μg·mL-1；但是裸鼠卵巢癌在體移植瘤實驗中，VBE-1的抑瘤作用并不明顯。比較EVn50、VBE-1二者在體內外

3、對卵巢癌細胞的抑制作用，發(fā)現(xiàn)EVn50體內外對卵巢癌細胞均有良好的抑制作用；VBE-1在體外對卵巢癌細胞抑制活性強，體內抑制活性弱。另外，VBE-1在大鼠體內生物轉化產生的3個代謝產物對腫瘤細胞抑制活性均很弱，代謝過程為失活過程。 本文繼續(xù)對VBE-2和EVn50在大鼠中的代謝過程進行研究。VBE-2在大鼠體內生成3個代謝產物，其中2個代謝產物從排泄物中分離得到并進行結構鑒定。這兩個代謝產物分別是6-羥基-4-（4-葡萄糖醛酸基

4、-3-甲氧基苯基）-3-羥甲基-5-甲氧基-3，4-二氫（3R，4S）-2-醛基萘和6-羥基-4-（4-羥基-3-甲氧基苯基）-2，3-二羥甲基-5-甲氧基-3，4-二氫（3R，4S）-萘。從VBE-2的代謝位點可知，VBE-2與VBE-1的代謝方式相同，均為4位酚羥基的葡萄糖醛酸化及2位醛基的還原。研究EVn50在大鼠體內代謝過程得知，EVn50中的VBE-1和VBE-2在大鼠尿液中以原型排出，此外還檢測到部分代謝產物。 本文

5、建立了VBE-1在大鼠體內HPLC-MS-MS的分析方法，并對方法學進行了驗證。實驗結果顯示該方法靈敏度高，結果穩(wěn)定，可用于VBE-1在大鼠體內藥物動力學研究。 為了研究VBE-1在體內外活性存在差異的原因，本文比較了VBE-1在單獨給藥、與VBE-2聯(lián)合給藥及有效部位EVn50給藥的3種形式下，VBE-1和代謝產物1、代謝產物3在大鼠體內的血藥濃度及藥物代謝動力學參數(shù)的差異。3種給藥方式下VBE-1在體內的代謝過程均符合一室模

6、型，藥動學參數(shù)如下：AUC0-4分別為1.12±0.50 mg·h·L-1、5.12±2.61mg·h·L-1、5.38±1.50mg·h·L-1； AUC0-∞分別為1.26±0.50 mg·h·L-1、5.79±3.14 mg·h·L-1、6.59±1.98 mg·h·L-1；t1/2分別為0.90±0.18 h、1.23±0.40 h、1.83±0.34 h：Cmax分別為0.97±0.57 mg·L-1、4.68±2.81 mg

7、.L-1、4.69±2.52 mg·L-1； Tmax分別為0.30±0.23 h、0.23±0.05 h、0.31±0.17 h。由以上結果可知，同等劑量條件下，VBE-1在單獨給藥時各藥動學參數(shù)與兩組混合物組相比有顯著性差異。VBE-1以混合物形式給藥，血藥濃度、AUC和Cmax有顯著地提高，說明VBE-1單體在體內活性不高是由于吸收過程產生的影響。兩個混合物給藥組的中VBE-1的AUC和Cmax沒有顯著性差異，說明EVn50中主要

8、是VBE-2對VBE-1有協(xié)同作用，促使VBE-1有效血藥濃度的提高。 VBE-1的兩個代謝產物的血藥濃度和藥代動力學參數(shù)與VBE-1的變化趨勢一致，說明代謝產物與原藥有正相關。 基于VBE-1、VBE-2和EVn50生物轉化及藥代動力學研究，推測VBE-1在體內外活性差異的可能原因是原因是VBE-1吸收少，體內血藥濃度低造成的；而EVn50中的VBE-2能促使VBE-1血藥濃度增高，其機理可能與促進吸收或競爭性代謝有