舌鱗狀細(xì)胞癌、涎腺腺樣囊性癌癌干細(xì)胞的篩選與檢測.pdf

1、目的：(1)檢測癌干細(xì)胞標(biāo)志物CD44、CD133在41例不同病理分級(jí)舌鱗狀細(xì)胞癌及47例不同病理分型涎腺腺樣囊性癌患者癌組織中的表達(dá)情況，研究以上標(biāo)志物表達(dá)程度的高低與舌鱗狀細(xì)胞癌及涎腺腺樣囊性癌病理表現(xiàn)的相關(guān)性。(2)建立舌鱗狀細(xì)胞癌及涎腺腺樣囊性癌耐順鉑株及高致瘤株。檢測耐順鉑株、高致瘤株的生物學(xué)特性，并研究耐順鉑細(xì)胞、高致瘤細(xì)胞癌干細(xì)胞標(biāo)志物CD44、CD133表達(dá)情況，探討耐順鉑細(xì)胞、高致瘤細(xì)胞與癌干細(xì)胞的關(guān)系。 方法

2、：(1)免疫組化方法檢測不同病理分級(jí)舌鱗狀細(xì)胞癌及不同病理分型涎腺腺樣囊性癌患者癌組織中癌干細(xì)胞標(biāo)志物CD44、CD133的表達(dá)。(2)以涎腺腺樣囊性癌ACC-M細(xì)胞株和舌鱗狀細(xì)胞癌Tca8113細(xì)胞系為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，采用間歇性給予順鉑，單一劑量，體外連續(xù)誘導(dǎo)培養(yǎng)，誘導(dǎo)耐藥性。雙層軟瓊脂克隆形成法篩選增殖能力較強(qiáng)的細(xì)胞，連續(xù)克隆篩選3次，建立高致瘤株； (3)MTT法檢測順鉑誘導(dǎo)細(xì)胞與親本細(xì)胞的耐順鉑濃度(IC50)；免疫細(xì)胞化學(xué)檢測順鉑誘

3、導(dǎo)細(xì)胞、瓊脂克隆細(xì)胞與親本細(xì)胞爬片耐藥蛋白MRP及腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD44、CD133的表達(dá)；流式細(xì)胞儀檢測順鉑誘導(dǎo)細(xì)胞、瓊脂克隆細(xì)胞與親本細(xì)胞的凋亡率；(4)建立裸鼠動(dòng)物模型；TUNEL法檢測移植瘤細(xì)胞凋亡情況，免疫組化法檢測移植瘤PCNA、CD44、CD133的表達(dá)。 結(jié)論：1、舌鱗狀細(xì)胞癌及涎腺腺樣囊性癌等口腔癌腫瘤組織中具有表達(dá)癌干細(xì)胞常用標(biāo)志物CD44、CD133的陽性細(xì)胞，未發(fā)現(xiàn)癌組織中CD44、CD133陽性表達(dá)強(qiáng)