舌鱗狀細胞癌、涎腺腺樣囊性癌癌干細胞的篩選與檢測.pdf

1、目的：(1)檢測癌干細胞標志物CD44、CD133在41例不同病理分級舌鱗狀細胞癌及47例不同病理分型涎腺腺樣囊性癌患者癌組織中的表達情況，研究以上標志物表達程度的高低與舌鱗狀細胞癌及涎腺腺樣囊性癌病理表現(xiàn)的相關性。(2)建立舌鱗狀細胞癌及涎腺腺樣囊性癌耐順鉑株及高致瘤株。檢測耐順鉑株、高致瘤株的生物學特性，并研究耐順鉑細胞、高致瘤細胞癌干細胞標志物CD44、CD133表達情況，探討耐順鉑細胞、高致瘤細胞與癌干細胞的關系。 方法

2、：(1)免疫組化方法檢測不同病理分級舌鱗狀細胞癌及不同病理分型涎腺腺樣囊性癌患者癌組織中癌干細胞標志物CD44、CD133的表達。(2)以涎腺腺樣囊性癌ACC-M細胞株和舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞系為實驗對象，采用間歇性給予順鉑，單一劑量，體外連續(xù)誘導培養(yǎng)，誘導耐藥性。雙層軟瓊脂克隆形成法篩選增殖能力較強的細胞，連續(xù)克隆篩選3次，建立高致瘤株； (3)MTT法檢測順鉑誘導細胞與親本細胞的耐順鉑濃度(IC50)；免疫細胞化學檢測順鉑誘

3、導細胞、瓊脂克隆細胞與親本細胞爬片耐藥蛋白MRP及腫瘤干細胞標志物CD44、CD133的表達；流式細胞儀檢測順鉑誘導細胞、瓊脂克隆細胞與親本細胞的凋亡率；(4)建立裸鼠動物模型；TUNEL法檢測移植瘤細胞凋亡情況，免疫組化法檢測移植瘤PCNA、CD44、CD133的表達。 結(jié)論：1、舌鱗狀細胞癌及涎腺腺樣囊性癌等口腔癌腫瘤組織中具有表達癌干細胞常用標志物CD44、CD133的陽性細胞，未發(fā)現(xiàn)癌組織中CD44、CD133陽性表達強