GEFT在心臟中的功能研究.pdf

1、心臟作為人類最早發(fā)育完成的器官，在整個生命過程中發(fā)揮重要作用。心臟的發(fā)育與形成取決于其細(xì)胞增殖、遷移、死亡和分化在時間和空間上的精確調(diào)控。其發(fā)育過程涉及一系列調(diào)控因子和相關(guān)信號通路，這些基因的突變或者異常表達(dá)都會導(dǎo)致心臟發(fā)育異常。小G蛋白亞家族Rho-GTP酶包括RhoA，Rac1和Cdc42等，它們在真核細(xì)胞的細(xì)胞進(jìn)程中發(fā)揮廣泛作用，如:維持細(xì)胞正常生長、增殖、分化、基因調(diào)控和細(xì)胞命運的決定等。Rho-GTP酶的激活是通過將其結(jié)合的G

2、DP轉(zhuǎn)換為GTP而實現(xiàn)，該過程通過特異性的鳥嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)換因子GEFs調(diào)控。GEFT屬于一種鳥嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)換因子，能夠特異性激活Rho-GTP酶。GEFT是在興奮性組織如心臟和骨骼肌中廣泛表達(dá)的一種鳥嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)換因子。已知其在許多細(xì)胞進(jìn)程過程中發(fā)揮重要調(diào)控功能。但是，GEFT在體內(nèi)的功能并不清楚，因此本實驗室構(gòu)建了基于Cre介導(dǎo)的GEFT在心臟中特異性條件敲除小鼠。GEFT條件敲除小鼠心臟表型正常，表明GEFT對于小鼠的心臟發(fā)育是非必

3、須。但是GEFT心臟特異性敲除小鼠在異丙腎上腺素刺激后易于心肌肥大，表明GEFT條件敲除小鼠可能失去了部分抑制心肌病理性肥厚的功能。通過western-blot分析發(fā)現(xiàn)Cdc42在GEFT心臟特異性敲除小鼠的心臟中的表達(dá)受到輕微的抑制，然而在異丙腎上腺素刺激后該抑制變得較為明顯。此外通過對心肌肥厚的相關(guān)分子進(jìn)行RT-PCR，發(fā)現(xiàn)GEFT心臟特異性敲除小鼠在病理刺激中p21、SRF和ANF等肥大相關(guān)基因出現(xiàn)明顯表達(dá)差異。我們進(jìn)一步通過熒光