骨質(zhì)疏松對(duì)大鼠正常膝關(guān)節(jié)軟骨的影響.pdf

1、目的：隨著我國(guó)逐漸進(jìn)入老齡化社會(huì)，老年人相關(guān)疾病呈增多趨勢(shì)。骨質(zhì)疏松癥(osteoporosis，OP)與骨性關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis，OA)是老年人中最常見的骨與關(guān)節(jié)疾患，近年來人們對(duì)OA與OP之間的關(guān)系進(jìn)行了大量的臨床調(diào)查和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究。但是各種研究的結(jié)果報(bào)道不盡一致，目前國(guó)內(nèi)外醫(yī)學(xué)界對(duì)OA與OP之間的關(guān)系尚未形成統(tǒng)一的觀點(diǎn)。動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)已經(jīng)成為研究OA與OP之間關(guān)系的有效方法，手術(shù)是造成OA動(dòng)物模型的常用手段，但是手術(shù)

2、引起的關(guān)節(jié)破壞與絕經(jīng)后引起的OA并不完全相同。卵巢切除大鼠是最常用來模擬絕經(jīng)后OP的動(dòng)物模型，最近的研究指出成熟大鼠（5個(gè)月以后）卵巢切除后可以被用來制作非創(chuàng)傷性絕經(jīng)后OA模型。盡管我們已經(jīng)知道雌激素對(duì)骨和軟骨有著雙重保護(hù)作用，但是OP繼發(fā)的OA是否是由于體內(nèi)雌激素缺乏引起的，目前尚不清楚。本課題通過研究去勢(shì)后SD大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨的病理變化，探討骨質(zhì)疏松與關(guān)節(jié)軟骨退變之間的關(guān)系。
　　方法：24只六月齡SD(Sprague-Dawl

3、ey)雌性大鼠隨機(jī)分為兩組，一組為假手術(shù)組（SHAM），一組為去勢(shì)組(OVX)，OVX組大鼠用5％水合氯醛（7 ml/kg）腹腔注射麻醉后經(jīng)腹側(cè)手術(shù)入路行雙側(cè)卵巢切除手術(shù)，SHAM組經(jīng)相同入路切除雙側(cè)卵巢周圍等量的脂肪組織。3個(gè)月后建立骨質(zhì)疏松模型。兩組分別于術(shù)后4、8、12周三個(gè)時(shí)間點(diǎn)各處死4只大鼠，切取大鼠股骨遠(yuǎn)端關(guān)節(jié)面軟骨，剔除周圍韌帶、半月板及軟組織，肉眼下大體觀察關(guān)節(jié)軟骨的外觀，后將股骨外髁去除只保留內(nèi)髁并置于福爾馬林液固定，

4、EDTA液脫鈣，石蠟包埋，垂直軟骨關(guān)節(jié)面行5um病理切片，并行蘇木素-伊紅(HE)及番紅O染色，鏡下觀察股骨內(nèi)髁關(guān)節(jié)軟骨的組織形態(tài)學(xué)變化，雙盲法參照Mankin評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)軟骨退變程度進(jìn)行分期，顯微鏡下人工測(cè)量關(guān)節(jié)軟骨的厚度、軟骨細(xì)胞和軟骨下骨小梁的數(shù)目，比較兩組大鼠在Mankin評(píng)分、關(guān)節(jié)軟骨厚度、軟骨細(xì)胞和軟骨下骨小梁的稀疏程度之間的差異。
　　結(jié)果：1.術(shù)后12周，運(yùn)用雙能X線骨密度測(cè)量?jī)x(DEXA)內(nèi)置小動(dòng)物軟件分別測(cè)量?jī)山M

5、大鼠骨密度(BMD)，結(jié)果顯示OVX組大鼠股骨、脛骨骨密度分別為0.126±0.018 g/cm2、0.115±0.012 g/cm2，SHAM組大鼠股骨、脛骨骨密度分別為0.187±0.011 g/cm2、0.146±0.011 g/cm2，;與SHAM組比較，OVX組大鼠股骨及脛骨骨密度顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　2.OVX組術(shù)后12周與1周時(shí)進(jìn)行比較，體質(zhì)量明顯增加(P＜0.01)，SHAM組體質(zhì)量隨時(shí)

6、間沒有明顯變化。
　　3.大體觀察:4周、8周時(shí)，OVX組與SHAM組大鼠的股骨髁可見關(guān)節(jié)面清楚，平整光滑，有光澤，關(guān)節(jié)軟骨無破壞，軟骨表面無潰瘍及縱行裂隙形成，關(guān)節(jié)邊緣無骨贅形成，兩組大鼠的關(guān)節(jié)軟骨未見明顯差異;12周時(shí)SHAM組大鼠膝關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)面光滑，有光澤，關(guān)節(jié)軟骨無破壞，OVX組關(guān)節(jié)軟骨面顏色變暗，失去光澤，軟骨變薄，顯示出軟骨下骨的顏色，表面粗糙欠平整，有纖維絮狀物生成，軟骨表面局部有潰瘍形成。
　　4.鏡下觀察:H

7、E及番紅O染色顯示4周時(shí)OVX組與SHAM組的軟骨厚度、軟骨細(xì)胞數(shù)量相近，關(guān)節(jié)面平整，潮線完整連續(xù)，軟骨基質(zhì)著色及軟骨下骨小梁數(shù)目無明顯差異;8周時(shí)OVX組大鼠與SHAM組大鼠相比股骨內(nèi)髁關(guān)節(jié)面有局部破壞，不光滑，潮線欠完整連續(xù)，軟骨細(xì)胞數(shù)量略有減少，軟骨下骨小梁稀疏，關(guān)節(jié)軟骨厚度變薄，軟骨Mankin評(píng)分增加;12周時(shí)，OVX組大鼠與SHAM組大鼠相比軟骨細(xì)胞數(shù)量明顯減少，關(guān)節(jié)面不光滑有剝脫，潮線明顯不連續(xù)，軟骨下骨小梁明顯減少，關(guān)節(jié)

8、軟骨厚度明顯變薄，Mankin評(píng)分顯著高于SHAM組。
　　結(jié)論：1.去勢(shì)大鼠隨著體內(nèi)雌激素水平的降低，股骨及脛骨骨密度也為之下降，成功的復(fù)制了絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥模型。
　　2.大鼠去勢(shì)后隨著骨密度的降低，出現(xiàn)了股骨內(nèi)髁負(fù)重區(qū)軟骨的逐漸破壞，表明骨質(zhì)疏松能夠引起正常軟骨的退變，可能對(duì)骨性關(guān)節(jié)炎的發(fā)生起推動(dòng)作用。
　　3.大鼠去勢(shì)后其膝關(guān)節(jié)軟骨和軟骨下骨在相同的時(shí)間點(diǎn)出現(xiàn)了各自的改變，并呈現(xiàn)相同的變化趨勢(shì)，由此說明關(guān)節(jié)