膝關(guān)節(jié)內(nèi)注射醫(yī)用臭氧對(duì)大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨、滑膜組織的影響.pdf

1、醫(yī)用臭氧(Ozone，O3)又稱三氧原子，是氧分子(Oxygen，O2)的同素異形體，具有僅次于氟的強(qiáng)氧化性。常溫下半衰期約20min，易分解和溶于水。性質(zhì)不穩(wěn)定，呈暫存狀態(tài)，在攜帶的氧原子除氧化后，組合為氧氣(O2)進(jìn)入穩(wěn)定狀態(tài)。醫(yī)用臭氧臨床廣泛應(yīng)用有近半個(gè)世紀(jì)歷史。早在第一次世界大戰(zhàn)中醫(yī)用臭氧用于治療因厭氧菌感染而受氣性壞疽折磨的德國(guó)士兵。近年來(lái)，隨著對(duì)醫(yī)用臭氧的生物藥學(xué)特性認(rèn)識(shí)的深入研究，醫(yī)用臭氧逐漸擴(kuò)展到感染性疾病、自身免疫性疾

2、病。安全性方面，在歐洲有2千萬(wàn)余人次的醫(yī)用臭氧治療，醫(yī)用臭氧基本自血療法等規(guī)范的治療未出現(xiàn)嚴(yán)重不良事件，顯示出醫(yī)用臭氧是一種非常安全的治療技術(shù)。臨床上有學(xué)者將醫(yī)用臭氧膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射的方法治療膝退行性關(guān)節(jié)炎，取得了良好的效果，但其作用機(jī)制尚不清楚。本研究擬從生化改變和形態(tài)學(xué)方面觀察不同濃度醫(yī)用臭氧膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射對(duì)軟骨、滑膜組織的影響。探討醫(yī)用臭氧治療退行性關(guān)節(jié)炎的可能機(jī)制，為臨床工作提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 第一部分：膝關(guān)節(jié)內(nèi)注射

3、醫(yī)用臭氧對(duì)大鼠退行性關(guān)節(jié)炎的形態(tài)學(xué)研究 目的：觀察醫(yī)用臭氧膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射對(duì)大鼠退行性關(guān)節(jié)炎的影響，探討醫(yī)用臭氧對(duì)大鼠退行性關(guān)節(jié)炎的防治效應(yīng)及可能機(jī)制。 方法：將SD大鼠40只隨機(jī)分為A(正常組)、B(模型組)、C(空氣組)、D(35μg/ml醫(yī)用臭氧組)、E(70μg/ml醫(yī)用臭氧組)五組，后四組復(fù)制出膝退行性關(guān)節(jié)炎(OA)模型，D、E組依據(jù)濃度不同，隔日1次給予膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射醫(yī)用臭氧，每次1ml，間隔一周再注射，共兩周

4、。4周后處死動(dòng)物，HE染色觀察光鏡下關(guān)節(jié)軟骨的一般形態(tài)、Masson染色進(jìn)行軟骨Mankin's評(píng)分，關(guān)節(jié)灌洗液超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)作為檢測(cè)指標(biāo)。 結(jié)果：B組光鏡下關(guān)節(jié)軟骨退變明顯，Masson染色可見藍(lán)綠色丟失較重，SOD下降，MDA升高；D組顯微鏡下關(guān)節(jié)軟骨形態(tài)觀察有明顯改善，Mankin's評(píng)分較A組無(wú)顯著性差異，與B、C組比較有顯著性差異(P<0.05)，SOD升高，MDA下降。E組顯微鏡下及Man

5、kin's評(píng)分較B組無(wú)明顯改善，SOD下降，MDA升高。 結(jié)論：濃度為35μg/ml醫(yī)用臭氧能夠減輕退行性關(guān)節(jié)炎軟骨退變，增強(qiáng)機(jī)體清除自由基的能力，從而有效防治退行性關(guān)節(jié)炎。而濃度為70μg/ml醫(yī)用臭氧可引起組織細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨組織結(jié)構(gòu)破壞。 第二部分：膝關(guān)節(jié)內(nèi)注射醫(yī)用臭氧對(duì)大鼠正常膝關(guān)節(jié)軟骨、滑膜組織影響 目的：觀察不同濃度醫(yī)用臭氧對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨組織的病理變化影響，以評(píng)估對(duì)正常軟骨、滑膜

6、組織的氧化應(yīng)激程度。 方法：32只實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為A、B、C、D四組。隨機(jī)選擇一側(cè)膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射醫(yī)用臭氧氣體。A組為濃度10μg/ml，B組為30μg/ml，C組濃度為50μg/ml，D組濃度為80μg/ml四組分別注射1ml氣體。注射醫(yī)用臭氧后2天、2周、4周后分別對(duì)膝關(guān)節(jié)軟骨、滑膜取活組織行病理學(xué)光鏡檢查，對(duì)側(cè)膝關(guān)節(jié)軟骨取活組織作空白對(duì)照組。 結(jié)果：與空白對(duì)照組比較，病理光鏡下顯示，關(guān)節(jié)內(nèi)注射10μg/ml醫(yī)用臭氧2

7、天、2周、4周后軟骨、滑膜組織未見明顯異常。50μg/ml濃度的醫(yī)用臭氧對(duì)軟骨、滑膜的氧化作用比30μg/ml的稍強(qiáng)，80μg/ml濃度的醫(yī)用臭氧氧化作用要強(qiáng)許多，軟骨在注射80μg/ml濃度的醫(yī)用臭氧后2周后出現(xiàn)不同程度的病理改變，并且4周后軟骨出現(xiàn)組織結(jié)構(gòu)破壞。 結(jié)論：當(dāng)濃度達(dá)到50μg/ml以上時(shí)，可能開始對(duì)軟骨、滑膜細(xì)胞產(chǎn)生損傷，80μg/ml濃度的醫(yī)用臭氧出現(xiàn)組織結(jié)構(gòu)破壞。提示在臨床應(yīng)用中30～50μg/ml的醫(yī)用臭氧